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蔬菜中
有机磷和氨基甲酸酯类
农药残留量快速检测
—酶抑制率法(分光光度法)
分光光度法的原理简介
酶抑制率法(分光光度法)
吸光光度法: 基于物质对光的选择
性吸收而建立的分析方法, 包括比
色法和分光光度法。
不同物质由于结构不同,所吸收光
的波长及吸收程度不同,这就是物质
对光的选择性吸收
当一束强度为I 的平行单色光通过一均匀的吸收介质时,
0
由于吸光物质分子与光子的作用,一部分光子被吸收,
一部分光子透过介质。设透过的光强度为I ,则透光率T
t
定义为T=I /I ,而-lgT称为吸光度A ,即
t 0
A=-lgT=lgI /I
0 t
入射光 I0 透射光 It
测量某物质对不同波长单色光的吸收程度,以波长()为横
坐标,吸光度(A )为纵坐标,绘制吸光度随波长的变化可得
一曲线,此曲线即为吸收光谱。
不同浓度的同一物质,它的最大吸收波长是不变的,但吸光
度随浓度增大而增大。
在最大吸收波长处测量吸光度,其灵敏度最高。
有色溶液对某一波长光吸收的强度与有色物质的浓度c及吸
光溶液的液层厚度b成正比,称为光吸收定律或朗伯-比尔
定律,其数学表达式为
A= εbc
式中:
b为液层厚度,单位为cm;
100 c为浓度,单位为mol.L-1;
1.0
T ε为摩尔吸光系数,单位
A
为L.mol-1.cm-1。
%
50
A 0.5 T
0
0
C
分光光度法(紫外-可见分光光度法)
光电比色法 Ultraviolet Visual
UV-VIS Spectroscopy
0.575
光源 单色器 吸收池 检测器 显示
参比 I0 I t
A lg lg T bC
I
0
样品 It 入
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