液相色谱仪的维护与保养 文档.pptVIP

正确使用色谱柱 ( 二 ) 色谱柱的在线保护装置 色谱柱的存放 启动液相色谱仪器的流程 高效液相色谱的维护与保养 液相色谱仪器的使用及保养 样品准备 样品完全溶解在流动相中 样品没有完全溶解 过滤样品，确保样品中不 含固体颗粒 用流动相或比流动相弱 的溶剂溶解样品 进样量尽量小 色谱泵的保养 ? 流动相要过滤 ? 常用缓冲液时，停泵前要用水冲洗，并用水冲 洗柱塞杆清洗孔 ? 拧紧排液阀时，不要太用力，以不渗液为准 ? 更换流动相时，要保证两种溶剂的互溶性 , 如 不互溶，要用一种中间溶剂过渡 . 例如 : 使用无机盐缓冲液时 , 用前和用后均须用 水过渡 流动相的脱气 ? 流动相脱气的目的 ? 使色谱泵的输液准确 ? 输液均匀准确，并且脉动减小 ? 保留时间及色谱峰面积的重现性提高 ? 提高检测的性能 ? 防止气泡引起的尖峰 ? 基线稳定，信噪比增加 ? 溶剂的紫外吸收本底降低 ? 保护色谱柱 ? 减少死体积 ? 防止填料的氧化 ? 加热 ? 简单，如同抽真空一起使用，其效果很好。但容易 造成流动相组成的变化 ? 抽真空 ? 同上，一般在溶剂抽滤的同时，也有脱气的效果 ? 超声波 ? 简单，但效果不理想。 ? 通惰性气体（一般用氦气） ? 可保持连续脱气，多用于低压梯度 ? 在线脱气机 ? 可保持连续脱气，多用于低压梯度 流动相脱气的方法 色谱泵的排气操作 ? ?? 使用前，应先确认泵头内没有气体，如 有气体要按以下步骤排气： ? 将排液阀反时针转 2-3 圈，用 10ml 注射器抽，直到出 液 ? 按以下方法之一将泵的后面放空 ? 将 U6K 的 C 阀打开，或 717 设在 PURGE 状态 ? 或，将参比阀打开 ? 或，把色谱柱摘下 ? 打开电源开关 ? 开大流速到 6~9ml/min ? 同时用 10ml 注射器从排液阀注入流动相 ? 直到泵后的流速稳定无气泡为止 色谱泵的运行 注意用外部控制器与用泵面板控制的区别 有些型号的外部控制器与面板不能同时用 如需要面板控制，需要断开控制线或关闭控制器 排气后的色谱泵即可运行 注意∶ 排气后，先设流速为 0 恢复排气时断开的部分，如∶进样器、色谱柱 如需要，恢复排气时断开的控制线 根据色谱柱的不同，逐渐提高流速到设定值 液相色谱对流动相的要求 ? 除色谱柱对流动相的要求外，还有∶ ? 与检测器匹配 ? 脱气 ? 避免卤素离子（不锈钢系统） ? 溶剂的粘度 ? 防止细菌的生长 Name Acetic Acid Acetone Acetonitrile Benzene Butyl Alcohol Carbon Tetrachloride Chloroform Cyclohexane Cyclopentane Dichloroethane Dichloromethane Dimethylformamide Dimethyl Sulfoxide Dioxan Ethylacetate Ethyl Alcohol Di-Ethylether Heptane Hexane Methyl Alcohol Methylethyl Ketone I-Octane Pentane I-Propyl Alcohol Tetrachloroethane Tetrahydrofuran Toluene Trichloroethane Water Xylene Di-Propylether Immiscible Miscible 溶剂的相溶性 溶剂的紫外吸收 Solvent UV Cutoff (nm) Acetonitrile 190 Water Cyclohexane 195 Hexane 200 Methanol 210 Ethanol 210 Diethyl Ether 220 Dichloromethane 220 Chloroform 190 240 Carbon Tetrachloride 265 Tetrahydrofuran 280 (210) Toluene 280 UV Cutoff is the wavelength