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- 2020-07-21 发布于广东
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学 海 无 涯
PCR 实验室在操作时应注意事项
PCR(基因扩增实验室)检测微量感染因子时,操作人员容易因为污染而导 致各种问题。SLD 中检实验室技术根据多年行业经验,给出的建议是:进行 PCR 操作时,操作人员一定要严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的 PCR 污染事故的发生。
一、PCR 实验室划分操作区:
目前,对于普通 PCR,业内还无法做到单人单管和实现完全封闭管理操作, 但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的物理区域内进行, PCR 的前处理和后处理一???要设计在不同的隔离区内进行:
1、标本处理区,包括:扩增摸板制备;
2、PCR 扩增区,包括:反应液的配制和 PCR 基因扩增;
3、产物分析区,包括:凝胶电泳分析,产物拍照及重组克隆制备。
各工作区要具有一定的隔离,操作器材要专用,而且要有一定方向性,如,
?标本制备→?PCR 扩增→?产物分析→④产物处理。切记:产物分析区的产物 及器材严禁拿到前后两个工作区,避免交叉污染。
二、PCR 实验室试剂分装要求:
PCR 扩增所需要的试剂均应在装有紫外灯的负压工作台或超净工作台进行 配制和分装,所有的吸头和加样器都需固定放于其中,吸头不能用来吸取扩增后 的 DNA 和其它来源 DNA:
1、PCR 用水应为高压的双蒸水;
2、引物和 d-NTP 用高压的双蒸水在无 PCR 扩
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