糖和苷类化合物PPT参考幻灯片.pptVIP

白芍原植物 白芍药材 * 乙醇提取 白芍饮片100 g,粉碎成粗颗粒,70%乙醇回流提取两次,第1次加8倍量提取60min,第2次加6倍量提取30 min,过滤,合并滤液,回收至无醇味,加水至药液浓度1g生药/ml。 大孔树脂分离 2倍AB-8大孔树脂吸附,柱径高比为12∶1,树脂柱上吸附30 min后,以3BV蒸馏水洗去糖,收集5BV 70%乙醇洗脱液,流速为3BV/h。 结果：浸膏中白芍总苷含量达60%以上。 方法可靠,成本较低, 可进行工业化大生产。 * 柴胡——伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.的干燥根。  实例2：柴胡总皂苷的提取 * 功效——和解表里，疏肝，升阳。用于感冒发热， 寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子官脱垂，脱肛。 用于寒热往来、感冒发热等症。 成分——柴胡皂苷（saikosapoins a、b、c、d等），甾醇，挥发油（柴胡醇、丁香酚等）等。 柴胡制成的单味或复方注射液，对外感发热有较好 的解表退热作用。 * 柴胡总皂苷的提取 柴胡细粉用含5％吡啶的甲醇提取(中和植物酸，防止皂苷次生化)，回收甲醇得浓缩物。加水后用水饱和正丁醇萃取，回收正丁醇， 加入乙醚使沉淀，过滤得粗总皂苷。 * 第四节 苷的结构研究 研究一般程序： 1.物理常数的测定 mp，[α]D等。 2.分子式测定—— 元素分析：定性定量分析元素种类和比例。 质谱分析法：分子量和分子式。 电子轰击质谱（EI-MS）：不易获得分子离子峰（极性大） 化学电离质谱（CI-MS）、场解吸质谱（FD-MS）、 快原子轰击质谱（FAB-MS） ：可用 高分辨快原子轰击质谱（HR-FAB-MS）：直接测分子式 * （1）酸水解得到苷元和糖 （2）苷元结构鉴定 （3）糖种类鉴定 纸色谱（PC）：分配原理 固定相：水 展开剂：正丁醇-乙酸-水(4：5：1，上层) BAW 显色剂：苯胺-邻苯二甲酸试剂 3.组成苷的苷元、糖的鉴定 * 薄层色谱（TLC）：硅胶——硼酸或无机盐溶液铺板 如0.3mol/L磷酸氢二钠或磷酸二氢钠水液 ①增大溶解度，提高点样量（可达400～500μg）。 ②降低吸附力，改善分离效果。 气相色谱（GLC）：水解、制备TMS衍生物（具挥发性）。 超导FT-NMR光谱: 各糖不同质子的δ、J 与标准糖比较 各糖不同碳原子的δ 与标准糖比较 * （4）糖数目测定 ●光密度扫描法：测定各糖斑点含量，计算各糖分子比， 推算糖数目。 ●质谱法：测定苷及苷元分子量，计算差值，求糖的数目。 ● 1H-NMR谱:测定糖端基质子信号（δ4～ 5ppm，较大）数目； 制成全乙酰化或全甲基化物，测定乙酰氧基、甲氧基信号 （δ、J）数目。 ● 13C-NMR谱:测定糖端基碳信号（δ90～112ppm）数目； 苷总碳信号数减去苷元碳信号数，推算糖数目。 * 4.测定苷元与糖、糖与糖连接位置 （1）化学方法: 苷全甲基化物进行甲醇解，鉴定（与对照品色谱）未全甲醚化单糖，游离羟基所在位置即糖与糖之间的连接位置。 * （2）13C-NMR谱法： 原理：苷化位移（GS）规律——糖和苷元成苷后， 苷元α-C、β-C和糖的端基C化学位移改变。 苷元和糖连接位置： 方法：比较苷和苷元13C-NMR谱，苷元-OH成苷碳原子（α-C）和相邻碳原子（β-C）信号发生位移，其它C几乎不变。辩别苷元的哪个碳原子与糖相连接。 醇羟基苷化——苷元α-碳向低场位移（δ+4～10ppm）， β-碳向高场位移（δ-0.9～4.6ppm） 酚羟基苷化——苷元α-碳向高场位移， β-碳向低场位移。 α β * 糖与糖之间连接位置： 依据：被苷化的糖中，α-C位移较大，β-C稍有位移。 方法：比较苷与相应单糖的13C-NMR谱，若内端糖的某 C原子向低场移动（δ+4～7ppm），相邻两C略向高场移动（δ-1～4ppm），内端糖的该C原子就是连糖的位置。 α β β * 5.糖与糖之间连接顺序的确定 苷 缓和酸水解 酶水解 乙酰解 全甲基化甲醇解 部分苷键断裂 的裂解产物 推断糖和糖 连接顺序 （1）部分水解法 * （2）波谱分析法 质谱（MS）法 : 依据：糖基碎片离子峰或分子离子脱糖基的碎片离子峰， 判断糖的连接顺序。 EI-MS (全甲基化、