荧光定量PCR检测技术.ppt

荧光定量PCR检测技术;实时荧光定量PCR技术;;实时荧光定量PCR;实时荧光定量PCR原理;利用电泳定量;实时荧光定量PCR原理;实时荧光定量PCR原理;实时荧光定量PCR原理;实时荧光定量PCR原理;什么是C(t)值;为什么要引入C(t)值;实时荧光定量PCR原理;实时荧光定量;实时荧光定量PCR原理;如何定量;荧光化学;一、TaqMan检测技术原理;;TaqMan检测技术原理示意图;TaqMan? 探针;TaqMan检测技术的设计;（一）选择靶基因;（二）选择探针;（二）选择探针;（三）选择引物;（三）选择引物;（三）选择引物;普通PCR临床检测技术的缺点;1、采用闭管检测，不需PCR后处理，并采用dUTP-UNG酶的防污染系统，扩增和检测一次同时完成。不需开盖，不产生污染，避免了假阳性。;2、探针与被检DNA序列特异杂交， 增强了特异性。 A、上下游引物和探针三道关卡控制其特异性； B、引物和探针都比较长，退火温度较高，非特异性扩增几率减少。;3、可定量结果，准确灵敏地反应了病原体的感染和治疗恢复情况。 ;FQ-PCR与普通PCR的区别;FQ-PCR与普通PCR的区别;二、SYBR荧光染料原理;;人医现所开展的检测项目;兽医现所开展的检测项目