实验一_鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法.docVIP

鸡新城疫血凝(HA)与血凝抑制(HI）抗体水平测定法 １.本次实验得目得与要求 掌握鸡新城疫血凝（ＨA)与血凝抑制（HI）抗体水平测定法,以便检查疫苗使用效果与制定合理免疫程序. ２.实验内容或原理 ?　　　某些病毒(如新城疫病毒，禽流感病毒等）能够与动物得红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象(HＡ）。这种红细胞凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制，即为红细胞凝集抑制试验（HI)。 ３．需用得仪器或试剂等 动物 健康成鸡2-5只,被检鸡１5—2５只。 器材 高压灭菌器、滤纸、试管、试管架、离心机、离心管、三棱针、内径2mm聚乙烯塑料管100cm、酒精灯、石蜡、96孔V型微量凝集试验板、0．02５mm微量吸液器、微型振荡器、微量移液器、脱脂棉等。 药剂（１)浓缩抗原;(２)生理盐水或磷酸缓冲盐水(PＢS)；(3）Alsｅver细胞保存液；(4)红细胞悬液;（5)待检血清 4。实验步骤 （１)发现与鉴定病毒：鸡新城疫与禽流感病毒分离后，这些病毒能凝集鸡得红细胞，又能被特异性得已知免疫血清抑制其凝集反应,即可鉴定此病毒。 ?(２）诊断病毒性疾病:如取同一发病得动物早期与恢复期血清进行红细胞凝集抑制实验,如抗体效价有4倍以上升高，即有诊断意义. (3)免疫机体抗体效价得测定： ?３、鸡新城疫(ND)得HA与HI （1）试验准备 ?①?抗原：一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUｒａ系冻干苗作为