水稻愈伤组织地诱导实验报告.docxVIP

生物技术 实验报告 水稻愈伤组织的诱导 一、实验目的 1、掌握外植体的消毒方法和接种技术； 2、了解愈伤组织诱导的过程。 二、实验原理 以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时，在一定的诱导培养条 件下都能诱导形成愈伤组织。 愈伤再经分化培养， 通过器官发生途径或体细胞胚 胎发生途径可再生成植株。 外植体源自自然环境均为带菌状态， 在接种前都必须进行消毒。 对于难消毒 的材料，有时要几种消毒剂配合使用； 对于多茸毛表面粗糙不平的材料， 要加展 著剂（吐温 20）以增强消毒效果。 三、实验材料与用具 1、材料：水稻成熟种子（用于诱导愈伤组织） ； 2、试剂： 75%酒精， 2% NaCLO，无菌水 ( 每组 1 瓶 400mL) ； 3、培养基：诱导培养基： NB+2,4-D 2mg/L+ 蔗糖 30g/L+琼脂 8g/L （pH5.8）； 4、仪器设备：培养室、超净工作台、培养皿（￠ 9cm ）2 个、枪形镊、量筒（ 100mL） 2 个、三角瓶（ 50mL、无菌） 2 个、废液缸、保鲜膜、标签纸。 四、实验步骤 1、接种室、培养基及用具表面消毒 用 75%酒精棉球试擦超净工作台、 镊子，将培养基及用具放工作台， 打开紫 外灯，照射 20 分钟以表面消毒。之后关紫外灯，打开工作台风机，通风 30 分 钟后可进行无菌操作。 2、种子去壳 选取饱满、无霉变、成熟的水稻种子，手工