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WB 免 疫 印 迹 实 验 常 见 问题 全 汇 总 精品文档 【干货收藏贴】WB 常见问题精品全集锦 做了很久的 WB（western blot ），走了很多弯路，但是 WB想要做好并不难， 总结 WB实验中可能会遇到的问题，分析可能的原因及对应的解决方案，这就是 实验成功的基石。 以下，我们先解决很多技术菌的疑惑，然后再着手汇总实验中常见问 题和可能原因分析以及给出建议解决方案。 WB常见问题分析 1.为什么我的细胞提取液中没有检测到目的蛋白？ 原因有很多： a) 细胞中不表达这种蛋白质，换一种细胞； b) 细胞中的蛋白质被降解掉了，可加入蛋白酶抑制剂，抑制蛋白酶活性； c) 抗体不能识别目标蛋白，多看看说明，是否有问题； d) 酶降解可能是没有保持 低温操作，样品保存不当，样品放置时间过长。 2.我做的蛋白质分子量很小（ 10KDa ），请问怎么做 WB ？ a)可以选择 PSQ 膜，同时缩短转移时间。也可以将两张膜叠在一起，再转