实验大肠杆菌半乳糖苷酶诱导表达教学幻灯片.pptVIP

马玉超 北京林业大学生物科学与技术学院 办公地点：生物楼117；电话 Email:myc0307@;实 验 内 容;大肠杆菌β-半乳糖苷酶的诱导表达 张妙直 ;乳糖操纵子;;大肠杆菌β-半乳糖苷酶是一类诱导酶 ? 无作用底物(乳糖或半乳糖苷)时，几个分子/细胞； ? 中性培养基中加入乳糖(诱导物)， 103~105倍； ? IPTG，不被分解，比乳糖提高~3倍； ? 葡萄糖效应：葡萄糖和IPTG，被显著阻遏； ? 葡萄糖+IPTG+cAMP，不受葡萄糖影响。;邻硝基苯酚-β-D-吡喃型 半乳糖苷 ONPG;实验材料;(2). 2×YT培养基 蛋白胨16g，酵母粉10g，NaCl 5g，加去离子水至1L。 (3). Z缓冲液 每升含有一下成分： Na2HPO4·12H2O (0.06 mol/L) 21.5g NaH2PO4·2H2O (0.04 mol/L) 6.2g KCl (0.04 mol/L) (0.01 mol/L) 0.75g MgSO4·7H2O (0.001 mol/L) 0.246g 巯基乙醇 (0.05 mol/L) 2.7 ml