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不同品种葛根中葛根素及总黄酮的 含星测定 【摘要】 目的建立不同品种葛根 中葛根素及总黄酮的含量测定方法。方法采 用RP-HPLC，以甲醇-水为流动相，检测 波长为250 nm测葛根素含量；紫外分光光 度法测柴葛、粉葛中总黄酮含量。结果葛根 素峰分离度提高，峰形改善；葛根素? it g 范围内与峰面积线性关系良好，回收率 为％(n=5),精密度RSD=%总黄酮浓度在? g/ml范围内与吸收度线性关系良好； 流速该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 1 ml/min ;检测波长 250 nm;柱温22C； 进样体积10引。理论板数按葛根素峰计算 不低于50000在该色谱条件下，样品中的葛 根素与其它峰均能达到基线分离， 保留时间该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 在min左右，对照品与样品的色谱图见图 1。 图1对照品I、柴葛索氏提取H、粉葛 索氏提取m的HPLCfe谱图 对照品溶液的制备精密称取葛根素对 照品，甲醇定容于25 ml量瓶。分别移取，，， ml于5 ml量瓶，水定容，与原液共同作为该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 HPLC用对照品溶液 供试品溶液的制备 热回流提取法：精密称取柴葛、粉葛粉 末各g ,置具塞锥形瓶中，精密加入 30%该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 醇50 ml ,称重。回流提取 30 min ,放冷， 称重并以30/醇补足减失重量，摇匀过滤， 取续滤液为供试品，待测。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 索氏提取法：称取柴葛、粉葛粉末各g, 精密称定，以甲醇为提取剂提取 4h,过滤， 浓缩提取液并用甲醇定容于 10 ml量瓶。超 声处理30min,取上清液以水定容于 10 ml 量瓶，待测。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 线性关系考察取对照品溶液， 按照 色谱条件进样10（1 l ,葛根素进样量X（（1 g） 为横坐标，以峰面积Y为纵坐标绘制标准曲 线，其回归方程为：Y= 6X 106X + 5X 104, r = 9。结果表明，葛根素进样量在? p g该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 范围内与峰面积线性关系良好， 可用外标两 点法计算含量。 精密度考察在“”项色谱条件下， 吸取 同一对照品溶液10引，连续进样5次，测 得峰面积，RSD=%表明进样与峰面积积分 的精密度良好。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 重复性考察取同一批柴葛、粉葛样品 5 份，按项下的方法制样后，以项色 谱条件进样10引，测定葛根素的峰面积， 按外标法计算含量，RSD=%表明分析方法 重复性良好。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 稳定性考察精密吸取对照品溶液 10 p l , 分别在 0, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48 h 时进 样，在 项下色谱条件下测定峰面积，该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 其RSD直为％表明葛根素在室内正常条件 下48 h内稳定，因此整个实验过程可以在 常温不避光的条件下操作。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 回收率考察精密称取已知葛根素含量 的同一样品药材粉末 5份，20 mg/份，精密 称定后，每份加入浓度为 mg/ml的对照品溶 液?ml ,按“供试品溶液制备”项下操作， 精密吸取10 p l ,进样，计算回收率。结果 见表1。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 表1加样回收率测定结果 样品测定按“供试品溶液制备”项下 操作，制备各样品溶液，精密吸取 10 J! l,该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 进样，在所选色谱条件下测定，外标两点法 计算含量，结果见表2。 表2样品中葛根素测定结果 紫外分光光度法测定葛根中总黄酮含 量 线性关系考察精密称取葛根素对照品 mg甲醇定容于25 ml量瓶。移取，，，，ml 置于10 ml量瓶，水定容，为紫外测总黄酮 用对照品溶液。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 以溶液浓度为横坐标，吸收度为纵坐标, 得线性方程：Y = + 2, r= 8。表明总黄 酮浓度在? p g/ml范围时与吸收度线性关 系良好。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 图2葛根素峰光谱扫描图谱 供试品制备 方法1 :分别称取柴葛、粉葛 g ,置于 圆底烧瓶，乙醇回流提取 3次，40 ml/次, 时间均为1 h。合并3次滤液并浓缩置25 ml 量瓶，乙醇定容。取1 ml用乙醇定容于100 量瓶，再取1 ml上清液于10 ml量瓶，水 定容，待测。以1 ml乙醇加水定容于10 ml 量瓶中为空白对照。该文档为文档投稿赚钱网作品，版权所有，违责必纠 方法2:取上述液相用索氏提取法制得 的待