琼脂稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度.docx

琼脂稀释法是将不同剂量的抗菌药物，加入融化并冷至 50C左右的定量 MH琼脂中，制成 含不同递减浓度抗菌药物的平板， 接种受试菌，孵育后观察细菌生长情况， 以抑制细菌生长 的琼脂平板所含最低药物浓度为 MIC。本法优点是可在一个平板上同时作多株菌 MIC测定， 结果可靠，易发现污染菌；缺点是制备含药琼脂平板费时费力。 培养基制备 使用MH琼脂，按商品说明书进行配制， pH7.2~7.4。淋病奈瑟菌使用 GC琼脂基础加1%添 加剂；其它链球菌使用含 5%（ V/V ）绵羊血的MH琼脂（当试验磺胺药时，使用溶解的马 血）。 含药琼脂平板制备 根据实验设计，将已倍比稀释的不同浓度的抗菌药物分别加入已加热溶解， 并在45~50 C水 浴中平衡的MH琼脂中，充分混匀倾倒灭菌平皿， 琼脂厚度3~4mm。通常按1 : 9比例配制 药物琼脂平板，根据需要来选择药物浓度范围。 配制好的含药琼脂平板应装入密封塑料袋中， 置2~8 C冰箱可贮存5天。 接种物制备与接种 制备浓度相当于0.5麦氏标准比浊管的菌悬液，再 1 : 10稀释，以多点接种器吸取制备好菌 液（约1~2卩I）接种于琼脂平板表面，每点菌数约为 104CFU，形成直径为5~8mm的菌斑。 接种好后置35C孵育16~20h （甲氧西林耐药葡萄球菌、万古霉素耐药肠球菌孵育时间应满 24h）,观察结果。奈瑟菌属、链球菌属细菌置 5%二氧化碳、幽