药物设计学_基因技术医学教学材料.ppt

*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*; The Principle of Drug Design—第六章;基因技术是一系列有关研究基因结构和功能的方法之一，是一项将生物的某个基因通过基因载体运送到另一种生物的活性细胞中，并使之无性繁殖（称之为“克隆”）和行使正常功能（称之为“表达”），从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术，描述这些方法的术语包括“DNA重组技术”、“基因工程”、“基因拼接”等。;1．利用基因工程技术可以获得天然来源难以得到的生理活性物质，并可提供足量的生物活性物质以进行结构、功能??性质等方面的研究，使之成为新药，并避免由于免疫抗原性等原因而带来的副作用。 2.利用基因工程技术可以向生物环境中引入能编码目的蛋白质的基因，这种蛋白质可再此环境中被大量的生产。 ○例如使某些活性蛋白、多肽基因在微生物、细胞以及动物、植物反应器中得到高效表达，使许多难以得到的生物活性物质如胰岛素、干扰素等批量生产。;3．利用基因工程技术可不断发掘和开发更多的新型生理活性物质。 ○例如红细胞生长素（EPO）、神经生长因子（NGF）等。 4. 利用基因工程技术可以改造内源性活性物质，对蛋白质的特异位置进行修饰，可以改变氨基酸的序列，在编码基因中引入特异的突变体，从而改变其物理化学性质，提高其生物活性、减少副作用 ○如将组织纤溶酶原激活剂tPA分子重组缩小后，半衰期明显延长，注射一次即可溶栓。;5．通过基因重组技术，能够获得新的化合物（包括自然界不存在的化合物），扩大药物来源，这正是制药工业引进基因工程的主要原因之一。;1973年,美国斯坦福大学医学院Prof.Coben及其研究小组把大肠杆菌质粒DNA酶切后插入抗四环素基因,组成一个可在大肠杆菌种复制,并表达出具有抗四环素及大肠杆菌质粒DNA双抗遗传表型的重组子;日新月异的生物技术不断推动着这场革命，生物工程药物将成为21世纪药业的支柱。 与生物制药直接相关的最新领域包括；组合化学（combinatorial chemistry）、药学基因（pharmacogenomics）、蛋白组学（proteomics）、蛋白治疗（gene therapy）、功能抗原学（functional antigenics）、生物信息学（bioinformatics）、高通量筛选（high-throughput screenign）和众所周知的基因组学（genomics，包括后基因组学）等。 ;一 基本知识 二 基因技术的一般介绍 重组蛋白的表达;一、基本知识;染色体上具有遗传作用的是脱氧核糖核酸即DNA。DNA链由两条碱基互补的脱氧核苷酸链反向平行旋转形成双螺旋结构。每个脱氧核苷酸由一个碱基、一个脱氧核糖及一个磷酸分子组成。碱基的不同决定了脱氧核苷酸种类的不同。 DNA中的碱基种类有四种：腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）。 基因是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。 基因是带有遗传性状的DNA片段，每个基因具有自身的遗传密码。基因决定着蛋白质的合成，有 “一个基因一个多肽链”的说法。 基因决定蛋白质，蛋白质决定代谢作用，代谢作用决定各种性状。 ;1、 核酸的分类和组成;DNA分子含有生物物种的所有遗传信息，分子量一般都很大。 DNA为双链分子，其中大多数是链状结构大分子，也有少部分呈环状结构。;核糖核酸（RNA）;2、核酸的结构;① RNA一级结构的特点;mRNA一级结构的特点;⑵ 核酸的高级结构特点;tRNA的高级结构;(1)氨基酸接受区包含有tRNA的3’-末端和5’-末端， 3’-末端的最后3个核苷酸残基都是CCA，A为核苷。氨基酸可与其成酯，该区在蛋白质合成中起携带氨基酸的作用。(2)反密码区与氨基酸接受区相对的一般含有7个核苷酸残基的区域，其中正中的3个核苷酸残基称为反密码;⑶ 二氢尿嘧啶区 该区含有二氢尿嘧啶。 ⑷ T?C区 该区与二氢尿嘧啶区相对， 假尿嘧啶核苷—胸腺嘧啶核糖核苷环(T?C)由7个核苷酸组成，通过由5对碱基组成的双螺旋区(T?C臂)与tRNA的其余部分相连。除个别例外，几乎所有tBNA在此环中都含有T?C 。 ⑸ 可变区 位于反密码区与T?C区之间，不同的tRNA该区变化较大。;②DNADNA的二级结构;DNA双螺旋结构的特点;DNA双螺旋结构的要点;（2）嘌呤碱和嘧啶碱基位于螺旋的内侧，磷酸和脱氧核糖基位于螺旋外侧。碱基环平面与螺旋轴垂直，糖基环平面与碱基环平面成90°角。 ;（3）螺旋横截面的直径约为2 nm，每条链相邻两个碱基平面之间的距离为3.4 nm，每10个核苷酸形成一个螺旋，其螺矩（即螺旋旋转一圈）高度为34 nm。 ;DNA双螺旋的稳定