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- 2020-08-07 发布于河南
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血液成分制备的操作规程
血液成份的制备目前国内外最常用的方法是手工分离法,它是根据血液成份的比重不同,用物理的方法分离各种血液成份。
1 设备和器材
1.1 设备
低温大容量离心机
高频热合机
计算机、打印机
速冻冰箱(-50℃
贮血冰箱(4℃±2℃
血小板保存箱(振荡仪)
净化室或净化台(百级)
托盘天平
分离支架或分浆夹板
1.2 器材
采血单袋、转移袋及无菌接头
三联输血袋
四联输血袋子、洗涤生理盐水联袋、止血钳、手术剪、软塑料片(配平物)
2 各种血液成份的制备
2.1 红细胞悬液制备
用三联袋采集的血液(有效期内),经3500rpm、4℃、加速9、减速5、离心8分钟。离心操作详见《离心机操作规程》,离心完毕后挂在分浆支架上,利用虹吸作用将全部血浆分至转移袋
2.2 洗涤红细胞制备
选用有效期内的全血或红细胞悬液,3500 rpm、4℃、8分钟离心,详见《离心机操作规程》。在100 级净化室内连接空袋转移出血浆和白膜层,剩余红细胞中加入同血浆等量的生理盐水,热合后混匀,再以3500 rpm、4℃、8分钟离心,去除上层盐水及白膜层,重复操作三次以上,最后一次红细胞内加入约等于红细胞量的1/2的生理盐水(要求洗涤后白细胞清除率≥80%,血浆蛋白清除率≥98%,红细胞回收率≥
2.3 浓缩血小板制备
泰尔茂三联袋采集的新鲜全血(要求4-6小时内的全血),以1600rpm、22℃、加速4、减速2、离心10分钟(轻离心),离心完毕后将血液轻轻拿出,切忌晃动,放在分浆支架上,利用虹吸作用分出上层的全部血浆(PRP),热合后,将血浆再以3200 rpm、22℃、加速9、减速5,分离出上层乏血小板血浆,留下少量血浆(不保存20-30ml,保存的50-70m
2.4 浓缩白细胞十血小板
四联袋采集新鲜全血(4-6小时内的全血)。3200 rpm、22℃、离心10分钟。分离出上层血浆至一个转移袋,留下约15-20ml血浆,然后将剩下的血浆连同白膜层及白膜层下0.5-1.0cm的红细胞层分离至另一转移袋中,将此转移袋
2.5 少白细胞的红细胞制备
有效期内的全血,以3500rpm、4℃、加速9、减速5、离心10
2.6 新鲜冰冻血浆制备
三联袋采集新鲜全血,以3500rpm、4℃、加速9、减速5、离心8分钟,分离出上层血浆。将分离的血浆再同样离心一次,分出上层无红细胞及其它碎片的血浆,称出重量输入计算机生成,贴上标签,立即放入-50℃冰冻贮存,要求采集后6小时内冰冻成块,有效期
2.7 普通冰冻血浆制备
全血在保存超过6-8小时或有效期内的任何时候经重离心(操作同新鲜冰冻血浆),分离出来的血浆,并于-20℃以下冰冻贮存或保存期超过1年后的新鲜冰冻血浆,即可成为普通冰冻血浆,有效期为5
2.8 冷沉淀的制备
制备冷沉淀的原料为带有转移袋的新鲜冰冻血浆(FFP),把新鲜冰冻血浆放入4℃±2℃冷藏箱中融化,待FFP基本融化,尚有少量冰渣时取出,迅速以3500 rpm、4℃、加速9、减速5、离心10分钟,在较低的室温下迅速分离上层血浆,剩下不溶解的白色沉淀物与25ml左右的少量血浆 ,即为冷沉淀,输入计算机生成,帖上标签,即刻置于-30
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