8.1 体内分析概述.pdf

一、体内药物分析概述 体内药物分析是对体内样本 （包括生物体液、器官或组织）中的药物、代谢物或内源性 物质的定量分析。体内药物分析是药代动力学研究和治疗药物监测 （Therapeutic Drug Monitoring, TDM ）的重要手段。 药物在临床前研究阶段，首先在试验动物体内进行药代动力学和毒代动力学研究；在临 床研究阶段，要对药物作用于人体的安全性与有效性作出评价。这些研究中，建立有效的体 内药物分析方法是首要任务。随着现代医学的不断进步，精准医疗和个体化治疗成为新的理 念。TDM 就是采用灵敏可靠的方法，检测患者体内的药物浓度，指导个体化用药方案的制 定，保证用药的有效性与安全性。另外，监测和研究体内内源性物质的浓度变化，对于某些 疾病的诊断及治疗具有重要意义；对于麻醉药品和精神药品滥用的检测和运动员体内违禁药 物的监测，也必须依据体内药物分析手段和技术才能完成。 药物产生药理作用的强度与其在体内作用部位（受体组织）的浓度直接相关，而药物在 体内主要依靠血液输送至作用部位，因此血药浓度可作为药物在作用部位浓度的表观指标， 即血液是体内药物分析的主要样品。另外，尿液、唾液、头发和脏器组织等也可作为体内样 品。药物在体内的某些代谢产物常具有一定的生理活性，它们在体内的变化规律对母体药物 的药理学与毒理学评价极为重要；机体内源性生物活性物质往往参与机体重要的生理过程， 其变化规律的异常改变也与某些疾病的发病机制密切相关。所以，体内特定药物代谢物和机 体内源性生物活性物质也是体内药物分析的目标。 二、常用方法 在测定体内药物及其特定代谢物或内源性生物活性物质时，除少数情况将体液作简单处 理后可直接测定外，通常在测定之前要对体内样品进行分离净化与浓集等样品前处理，从而 为体内样品中药物的测定提供良好的环境与条件。 体内样品大都具有以下性质特点：①采样量少，采样量一般为数毫升至数十微升，且在 -9 -6 特定条件下采集，不易重新获得。②待测物浓度低，通常在 10 ~10 g/ml 级，甚至低至 -12 + + 10 g/ml 。③干扰物质多，血样中含有蛋白质、脂肪、尿素等有机物和Na 、K 等大量内源 性物质通常对测定构成干扰；且体内的内源性物质可与药物结合，也能干扰测定。 因此，体内药物分析的特点是：①体内样品需经分离与浓集，或经适当的处理后才能进 行分析；②对分析方法的灵敏度及专属性要求较高；③分析工作量大，测定数据的处理和结 果的阐明繁琐费时。 -10 -6 生物样本中所含药物或其特定代谢产物的浓度大多较低（10 ~10 g/ml ），且难以通过 增加体内样品量提高方法灵敏度。目前，体内药物分析常用的检测方法主要有色谱分析法、 免疫分析法和生物学方法。 1. 色谱分析法 主要包括气相色谱法、高效液相色谱法、色谱-质谱联用法等，可用于 大多数小分子药物的体内检测。目前色谱分析法，尤其是 HPLC 及其联用技术 LC-MS 与 LC-MS-MS 已经成为体内样品中药物及其代谢产物分析检测的首选方法，并逐步应用于蛋 白质、多肽等生物大分子类药物或内源性物质的检测与分析。 2. 免疫分析法 主要有放射免疫分析法（RIA ）、酶免疫分析法（EIA ）、荧光免疫分析 法（FIA ）等，多用于蛋白质、多肽等生物大分子类物质的检测。 3. 生物学方法 微生物学方法常能反映药效学的本质，可用于抗生素类药物的体内分 析。但生物学方法一般特异性较差，常需采用特异性高的方法（如色谱分析法）进行平行监 测。