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第四章 柠檬酸发酵机制; 重点：柠檬酸生物合成途径
柠檬酸生物合成的代谢调节机制
难点：柠檬酸生物合成的代谢调节机制 ;一、柠檬酸简介;从柑橘提取
固态发酵（薯干粉、淀粉粕以及含淀粉的农副产品 ）
液态浅盘发酵（黑曲霉，泡盛曲霉、米曲霉、温氏曲霉、绿色木霉 ）
深层发酵（黑曲霉/薯干粉 ）
石油（石蜡油）解脂假丝酵母 50%提高至80%
固定化细胞循环生物反应器发酵技术
每生产1t柠檬酸分别消耗2.5～2.8t糖蜜，2.2～2.3t薯干粉或1.2～1.3t蔗糖。人们正在大力开发
;三、我国柠檬酸生产现状;*;第二节 柠檬酸合成途径与代谢调控;二、黑曲霉柠檬酸生物合成途径; 黑曲霉利用糖类发酵生成柠檬酸其生物合成途径是，葡萄糖经EMP、HMP途径降解生成丙酮酸，丙酮酸一方面氧化脱羧生成乙酰CoA，另一方面经CO2固定化反应生成草酰乙酸，草酰乙酸与乙酰CoA缩合生成柠檬酸。;三、柠檬酸生物合成的代谢调节机制; 1、磷酸果糖激酶（PFK）：;2、丙酮酸羧化酶：催化生成草酰乙酸。;（二）三羧酸循环的调节; 3、α-酮戊二酸脱氢酶的调节 ;(三)氧对柠檬酸积累的调节;（四）乙醛酸循环与醋酸发酵柠檬酸; ①Mn2+缺乏→抑制蛋白合成→NH4+↑，有一条呼吸活动强的不产生ATP的侧呼吸链：解除磷酸果糖激酶的代谢调节，促进EMP途径畅通。
②丙酮酸羧化酶是组成型酶，不被调节控制。丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA和CO2的固定两个反应的平衡，以及柠檬酸合成酶不被调节，增强了合成柠檬酸的能力。;（五）柠檬酸发酵的产率;2、通过 CO2固定反应提供C4二羧酸;四、柠檬酸发酵过程的控制要点;五、柠檬酸产生菌育种的传统方法：; 3. 不分解柠檬酸的菌株 ? ? 不利用柠檬酸为碳源的菌株，说明其TCA循环中柠檬酸后续酶的活性较低，或者丧失，这有利于积累柠檬酸。 方法：以柠檬酸为唯一碳源的培养基上生长不好的突变株。
4. 选育不长孢子、少长孢子、迟长孢子的菌株 ? 在培养基中如果菌株能够大量合成积累柠檬酸，自然会使TCA循环中的中间产物浓度降低，这样不利于孢子的形成。
（为何？中间产物少，C架少，不利于合成代谢……） ;思考题
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