荒漠植物无叶假木贼种子萌发过程对低温的响应.pdf

摘 要 由于气候变化和人为活动的影响，荒漠幼苗自然更新困难，因此研究荒漠种子萌发 特性和幼苗适应机制对荒漠区植被恢复具有重要意义。荒漠植物生存于极端严酷的环境 条件下，有其特殊的种子萌发和幼苗更新机制，并且不同植物种子萌发过程对逆境胁迫 Anabasis aphylla 的适应性很大程度上影响着植物的生长发育。无叶假木贼 （ ）属于藜科 （Chenopodiaceae ）假木贼属 （Anabasis）隐胎生植物，具有耐盐碱、抗严寒、抗干旱和 固沙改土等特性，对维持荒漠区群落的构建和群落稳定性具有重要的生态价值。野外调 查发现无叶假木贼种子在早春时期具有 “融雪萌发”的现象，然而此时荒漠区昼夜温差 大，气温易波动，地表常处于反复冻融的状态，萌发的幼苗易受低温影响。因此，本文 1 对无叶假木贼种子萌发过程对低温的适应性进行研究，主要分为三部分内容： （）研 究无叶假木贼 （梭梭）种子萌发对低温的响应； （2 ）研究无叶假木贼 （梭梭）种子不 同萌发阶段的低温耐受性及生理变化； （3 ）运用转录组测序和同位素标记 （iTRAQ ） 技术对低温下无叶假木贼种子不同萌发阶段的差异基因和差异蛋白进行分析。本研究揭 示了荒漠隐胎生植物无叶假木贼种子的低温萌发特性，探讨了种子萌发过程对低温的适 应性。主要结果如下： （1）本文通过研究温度对无叶假木贼和梭梭种子萌发的影响及其吸水规律发现， 两种荒漠植物种子的吸水特性一致，种子的吸水能力强，吸胀过程用时较短，在0～20min 为急剧吸水期，60min 内吸水达到饱和。种子在常温和低温下吸水无显著差异，无叶假 木贼种子吸水相比于梭梭种子更不易受低温影响。两种荒漠种子在不同温度下均可萌发， 随着温度的降低，初始萌发时间随之延长，种子的萌发速率及萌发指数随之降低，但最 终萌发率无显著差异，并且各温度下的最终萌发率均达到90% 。通过积温效应分析，确 定了无叶假木贼和梭梭种子萌发的最低温度分别为0.54 ℃和0.79 ℃，积温值分别为 9.89℃·d 和7.26℃·d 。 （2 ）本研究发现无叶假木贼和梭梭种子不同萌发阶段的低温耐受特征大致相同， 表现为吸胀 （Ⅰ）和露白 （Ⅱ）阶段对低温的耐受性较强，而脱去种皮 （Ⅲ）和伸长生 长 （Ⅳ）阶段随着温度的降低，存活率急剧下降。无叶假木贼和梭梭种子不同萌发阶段 ≈ 的低温耐受程度分别表现为Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ和Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ，其中无叶假木贼种子的低温 耐受性相比于梭梭种子较强。随着低温萌发的进行，无叶假木贼种子中POD 和可溶性 蛋白呈先升高后降低的趋势，SOD 和CAT 活性呈逐渐降低的趋势，MDA 和可溶性糖呈 逐渐升高的趋势。梭梭种子在萌发过程中的POD 和可溶性蛋白的变化规律与无叶假木 贼种子较为一致，并且两种植物种子中的SOD 、POD 、CAT 及可溶性蛋白均表现为Ⅰ 和Ⅱ阶段高于Ⅲ和Ⅳ阶段。 （3 ）基于以上研究基础，本文运用RNA-Seq 技术对无叶假木贼干种子 （W 1），吸 胀 （W2 ），脱去种皮（W3 ）及伸长生长 （W4 ）四个阶段进行转录组测序，共获得582580 I Transcripts 和48494 1 Unigenes，Unigenes 的平均长度为864bp ，N50 的长度为15661bp 。 通过对不同阶段比较组中的下调基因进行分析发现，在W2 vs W 1，W3 vs W2 和W4 vs W3 比较组中的下调表达基因分别有5096、5438 和 1474 个。与W 1 阶段相比，其他阶 段的下调基因数量表现为W4W3W2 ，并且有2787 个共下调表达的基因，主要包括编 码细胞色素P450，BURP 结构域蛋白，油脂蛋白，半胱氨酸蛋白酶抑制剂及胚胎晚期丰 富蛋白等基因。四个阶段中连续下调表达的基因包括胚胎晚期丰富蛋白，油脂蛋白及可 能蛋白质磷酸酶2C 等。 （4 ）在转录组测序的基础上，本文运用iTRAQ 技术对无叶假木贼种子的四个萌发