实验1、紫外可见光谱实验报告.pdfVIP

一、实验 目的 1、 学会使用UV-2550型紫外-可见光分光光度计。 2 、 掌握紫外— 可见分光光度计的定量分析方法。 3 、 学会利用紫外可见光谱技术进行有机化合物特征和定量 分析的方法。 二、实验原理 基于物质对200-800nm光谱区辐射的吸收特性建立起来的分析测 定方法称为紫外— 可见吸收光谱法或紫外— 可见分光光度法。紫外— 可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生，同时伴随着分子的振 动能级和转动能级的跃迁，因此吸收光谱具有带宽。紫外— 可见吸收 光谱的定量分析采用朗伯- 比尔定律，被测物质的紫外吸收的峰强与 其浓度成正比，即： 其中A 是吸光度，I、I 分别为透过样品后光的强度和测试光的强 0 度，ε为摩尔吸光系数，b为样品厚度，c为浓度。 紫外吸收光谱是由于分子中的电子跃迁产生的。按分子轨道理 论，在有机化合物分子中这种吸收光谱取决于分子中成键电子的种 类、电子分布情况，根据其性质不同可分为3种电子： （1）形成单 键的σ 电子 ； （2 ）形成不饱和键的π 电子 ； （3 ）氧、氮、硫、卤素 等杂原子上的未成键的n 电子 。 图1. 基团中的σ ，π ，n成键电子 当它们吸收一定能量ΔE后，将跃迁到较高的能级，占据反键轨 道。分子内部结构与这种特定的跃迁是有着密切关系的，使得分子轨 道分为成键σ轨道、反键σ*轨道、成键π轨道、反键 π * 轨道和n轨 道，其能量由低到高的顺序为：σπnπ *σ* 。 图2 .分子轨道中的能量跃迁示意图 仪器原理是光源发出光谱，经单色器分光，然后单色光通过样品 池，达到检测器，把光信号转变成电信号，再经过信号放大、模/ 数 转换，数据传输给计算机，由计算机软件处理。 三、仪器与溶液准备 1、 UV-2550型紫外— 可见分光光度计 2 、 1cm石英比色皿一套 3 、 UVprobe 电脑软件 4 、 配置好的10μg/mL 、15μg/mL 、20μg/mL 以及未知浓度的 甲基紫溶液，甲基红溶液 5、 仪器的基本构成： 紫外可见分光光度计的基本结构如下： 光源→单色器→吸收池→检测器→信息处理与显示系统 样品 四、实验步骤 1、打开电源，开启紫外— 可见分光光度计上的开关，打开电脑 上的UVprobe软件，让其 自检，约5min后，对仪器相关参数设置。设 置波长范围为400-200nm ，高速检测，间隔为0.5nm 。 2 、空白对比实验。取一定量的蒸馏水装进1cm石英比色皿至 2/3 ，在Win-UV 主显示窗口下，单击所选图标“基线” 以扫描蒸馏水 的测定吸收曲线。 3 、取一定浓度的的水杨酸溶液，装进石英比色皿中放到紫外— 可见分光光度计中，获得波长-吸收曲线，读取最大吸收的波长数据 和吸光度。得到其标准图谱。 4 、同样的方法测定一定浓度的水杨醛溶液，获得波长-吸收曲 线，读取最大吸收的波长数据和吸光度。得到其标准图谱。 5 、同样的方法测定未知溶液，获得波长-吸收曲线，读取最大吸 收的波长数据和吸光度。得到其图谱。 6 、数据处理和分析。 7 、结果与讨论。 五、实验数据处理 1 ．实验数据记录 将实验数据用excel作图可得到水杨酸和水杨醛的紫外可见分光 波谱图，分别如图3和图4 . 图3 实验1水杨酸的紫外可见分光波谱图 图4 实验2 水杨醛的紫外可见分光波谱图 图5 实验3 未知溶液的紫外可见分光波谱图 2.实验数据处理 由实验3所得的可见分光波谱图可知，该溶液的最大吸收波长为 245nm ，对比图3 、图4 ，该溶液为水杨酸溶液。, 将波长为580nm 时不同浓度的甲基紫溶液的吸光度列出如表1。 表1，所测溶液最大吸光度数据 溶