第02章 糖和苷 07天然药物化学.pdf

天然药物 化学 第2章糖和苷 第7讲糖的提取与分离 预备知识 • 提取方法 • 分离精制方法 学习目标 • 了解糖苷类化合物的提取注意事项 • 了解糖类化合物分离精制的方法 糖苷类化合物的提取 • 杀酶保苷 • 采集新鲜材料 • 迅速加热干燥；冷冻保存 • 溶剂法：水；稀醇(单糖、低聚糖、多糖) • 糖类: 冷热水、冷热稀醇 • 苷类: 根据极性大小，选择相适应的溶剂 糖类化合物的分离与精制方法 • 蛋白质除去法 • 季铵氢氧化物沉淀法 • 分级沉淀或分级溶解法 • 活性炭柱色谱 • 纤维素色谱 • 离子交换柱色谱 • 凝胶柱色谱 • 制备性区域电泳 1、蛋白质的除去方法 • 粗多糖，常夹杂有较多的蛋白质 • 方法 • Sevag法 • CHCl +戊醇(丁醇)+多糖水溶液5 ：1：25→剧烈振摇20 min→离心，除去两相间的变性蛋白 3 • 温和，但要重复5次 • 三氟三氯乙烷法 • 多糖水溶液+CF -CCl 1:1→搅拌10 min→离心取水层，2次 3 3 • 温和 • 三氯醋酸法 • 多糖水溶液，滴加3%CCl COOH→至不继续混浊为止→5~10℃过夜→离心除沉淀 3 • 酶解法 • 多糖水溶液+胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、链蛋白酶等 • 糖Pr的处理 • 硼氢化钾+稀OH- • 注意：处理时间要短，温度要低 • 避免多糖降解 2、季铵盐沉淀法 • 季铵盐氢氧化物 季铵氢氧化物 + 酸性糖（含-COOH） 沉淀 - OH - + OH + N • 是一类乳化剂 C16H33 N C16H33 • 可与酸性多糖形成↓ CTA-OH CP-OH • 溶液pH↑或含硼砂缓冲液(糖酸性↑)→中性多糖↓ • 常用的季铵盐 • CTAB (十六烷基三甲胺溴化物)氢氧化物(CTA-OH) • CP-OH (十六烷基吡啶) • 操作 • 1~10% CTAB或CP-OH，搅拌下滴加于0.1~1% 多糖溶液中(pH9, 无 硼砂) • 酸性多糖↓ • 控制季铵盐浓度，可分离不同的酸性多糖 3、分级沉淀、分级溶解法 • 糖水溶液，逐步加乙醇(丙酮)→各部分↓ • 多糖通常在pH=7时进行 • 酸性多糖在pH=2~4时进行 •