牛结核病提纯结核菌素变态反应试验.pdf

精选 牛结核病提纯结核菌素变态反应试验 1. 原理 机体受到结核杆菌刺激时，导致 T 淋巴细胞转变为淋巴母细胞，并进而增殖分化 为致敏淋巴细胞，使机体致敏；以后如再次接触结核菌时（结核菌素） ，致敏淋巴细胞 即释放出各种淋巴因子，一方面使机体表现特异性的细胞免疫，而另一方面则发生迟发 型变态反应，出现以单核细胞浸润，以及由于巨噬细胞释出溶酶体酶（水解酶）和淋巴 细胞释出淋巴毒素所引起的组织环死为特征的病理现象。 皮内注射提纯结核菌素（ PPD ）于正常动物，不出现显著的局部炎症反应。相反，如果 将其注入曾感染结核病而致敏的动物，便发生迟发型超敏感性应答，在几小时之内注射 局部不出现肉眼的或组织学的变化，但以后血管扩张，通透性增加，因而出现红斑和水 肿，肿胀硬固。组织检查，这种病变和典型的急性炎症反应不同的是，浸润细胞主要是 单核细胞，即巨噬细胞和淋巴细胞，虽然反应初期也出现短暂的嗜中性白细胞的积聚。 注射后 24-72 小时反应程度最强，以后逐渐消退。非常严重的反应，在注射局部可发生 坏死。 2. 器材与试剂 酒精棉、卡尺、 1-2.5ml 注射器、针头、牛型提纯结核菌素。 3.操作方法 3.1 注射部位及术前处理：在颈侧中部上 1/3 处剪毛（或提前一天剃毛） ，三个月以内的 犊牛，也可在肩胛部进行，直径约 10cm ，用卡尺测量术部中央皮皱厚度，作好记录。 如术部有变化时，应另选部位或在对侧进行。 ( 图-1) 欢迎下载 精选 图片 1 位置 3.2 注射剂量：不论大小牛只，一律皮内注射 1 万国际单位。即将牛型提纯结核菌素稀释成 每毫升含 10 万国际单位后，皮内注射 0.1ml 。如用 2.5ml 注射器，应再加等量注射用水皮 内注射 0.2ml 。冻干菌素稀释后应当天用完。 3.3 注射方法：先以 75% 酒精消毒术部， 然后皮内注入定量的牛型提纯结核菌素， 注射后局 部应出现小泡，如注射有疑问时，应另选 15cm 以外的部位或对侧重作。 3.4 注射次数和观察反应：皮内注射后经 72 小时判定，仔细观察局部有无热痛、肿胀等炎 性反应， 并以卡尺测量皮皱厚度， 作好记录。 对疑似反应牛应即在另一侧以同一批菌素同一 剂量进行第二回皮内注射，再经 72 小时后观察反应。如有可能，对阴性和疑似反应牛，于 注射后 96 和 120 小时再分别观察一次，以防个别牛出现较晚的迟发型变态反应。 欢迎下载 精选 图片 -2 用微标卡尺测量检测部位厚度 3.5 结果判定： 3.5.1 阳性反应：局部有明显的炎性反应。皮厚差等于或大于 4mm 以上者，其记录符号为 （+ ）。对进出口牛的检疫，凡皮厚差大于 2mm 者，均判为阳性。 3.5.2 疑似反应：局部炎性反应不明显，皮厚差在 2.1-3.9mm 间，其记录符号为（ ±）。 3.5.3 阴性反应：无炎性反应。皮厚差在 2mm 以下，其记录符号为（