细胞凋亡及其调控.ppt

第四章 细胞凋亡及其调控;细胞凋亡的特征及意义 细胞凋亡的发生机制 检测凋亡的常用方法和技术 细胞凋亡的调控 细胞凋亡与疾病;细胞凋亡（aopotosis，a Greek word that means “dropping off” or “falling off”)是机体细胞在正常生理或病理状态下发生的一种自发的、程序化的死亡过程，其发生受到机体的严密调控 细胞凋亡对多细胞生物的生长发育和正常生命活动至关重要，与许多疾病的发生也相关 ;2002年10月7日英国人悉尼·布雷诺尔、美国人罗伯特·霍维茨和英国人约翰·苏尔斯顿，因在器官发育的??传调控和细胞程序性死亡方面的研究获诺贝尔诺贝尔生理与医学奖。;§4.1 细胞凋亡的特征及意义;Cell structure changes during apoptosis. The top panel shows a normal cell. The lower panel shows an apoptosing cell; arrows indicate condensed nuclear fragments. ;检测凋亡的常用形态学方法;(2)电子显微镜观察;凋亡细胞的生物化学特点;3、凋亡细胞的结局;;;二、细胞凋亡的生物学意义;细胞凋亡在鸭和鸡的脚的形态发生中的作用 ;细胞凋亡在非洲爪蟾发育过程中尾巴消失中的作用;2、淋巴细胞的成熟和维持免疫系统的功能;4、细胞凋亡与衰老密切相关; ;Overview of the evolutionarily conserved apoptotis pathway in C. elegans and vertebrates.;Regulators促进或抑制凋亡，CED-9 和 Bcl-2在营养因子存在的情况下抑制细胞凋亡. Adapters 作用于调控蛋白和效应蛋白;在营养因子存在的情况下促进效应蛋白的激活. 蛋白酶 caspases（胱天蛋白酶） 是胞内一种重要的效应蛋白;其活化可导致胞内底物的降解，最终导致细胞死亡.;一、caspase与细胞凋亡 1、caspase的种类与性质 胱天蛋白酶caspase（天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶）,活性位点含有QACXG（X=R，Q，C）保守氨基酸序列。 这类酶都以无活性的酶原形式合成并存储在细胞中。N-端为一个序列、长度特异的原结构域，是caspase的活性调节结构域，其后是一个大亚基和一个小亚基序列。;Caspase被活化时，在原结构域C-端及大、小亚基间保守序列的Asp位点被切割，游离的大、小亚基结合成异二聚体，其活性中心由两个亚基的部分氨基酸序列共同构成。 caspase异二聚体可进一步二聚化，形成活性更强的四聚体。 ;迄今共发现14种caspase，根据其结构的同源性分3个亚家族： Caspase-1亚家族：caspase-1，4，5，11，12，13，14。它们的活化与炎症因子的合成有关，多数情况下不是细胞凋亡的直接效应分子。 Caspase-2亚家族：caspase-2 Caspase-3亚家族：caspase-3，6，7，8，9，10。它们都直接参与介导细胞凋亡过程 ; 根据caspase前体分子(procaspase)的N-端原结构域, 以及它们在细胞凋亡中的作用不同，caspase-3亚家族也可以分两类： 具有”long-prodomain”的起始分子initiators，如caspase-8, 9, 10等。 可以通过这种long-prodomain与胞膜上的受体和接头蛋白构成的caspase激活复合物结合，结果使caspase起始分子发生聚集，并通过分子间切割而活化，继而切割活化下游的caspase分子。 ;具有“short-prodomain”的效应分子，如caspase-3, 6, 7。 它们不能相互聚集，只能作为上游caspase的底物，活化后作用于胞内多种蛋白质或酶类，促使细胞凋亡。 (p517, 表21-2） ; caspase对底物的酶切作用是高度特异的，至少可识别包括Asp在内的4个氨基酸残基并切割Asp后的肽键，该作用同时受底物空间结构的影响。 不同的caspase对其底物的氨基酸序列亲和力不同，与其功能相适应。 N- -Asp – X – X- X- -C 疏水 多样化 可变，Glu最佳 ; Four caspase pathways involved in apoptosis Adapted from “Cytokine Bulletin”;Cell typ