基因工程的操作.pptxVIP

第二节 基因工程的基本 操作程序;生长快、肉质好的转基因鱼(中国); 基因工程（DNA重组技术）是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。;一、目的基因的获取;从基因文库中获得目的基因;基因组文库:;基因组文库的构建;② cDNA文库的构建-----反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。;;;思考？;利用PCR技术扩增目的基因;3、基本前提：; 是一小段单链DNA，作为DNA复制的起始点，在核酸合成反应时，作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链.;利用PCR技术扩增目的基因;PCR扩增仪;;二、基因表达载体的构建;;①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因 和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载 体基础上增加了目的基因、启动子、终止子 三部分结构. ②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又 用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两 种酶作用的化学键都是磷酸二酯键. ③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少. ④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表 达载体的方式携带进去。;三、将目的基因导入受体;1、农杆菌转换法;转化过程;2、基因枪法;3、花粉管通道法;B、将目的基因导入动物细胞;;C、将目的基因导入微生物细胞;四、目的基因的检测与鉴定;受体细胞的DNA是否插入了目的基因;目的基因是否转录出了mRNA;检测目的基因是否翻译成蛋白质;1、在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是 A ．用mRNA为模板逆转录合成DNA B ．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C ．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D ．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA;2、下列高科技成果中，根据基因重组原理进行的是（ ） ①我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻 ②我国科学家将苏云金杆菌的某些基因移植到棉花内， 培育出抗虫棉 ③我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒 ④我国科学家通过体细胞克隆技术培养出太空牛 A．①B．①②C．①②③D．②③④ 答案：B;3、镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是 （ ） A．解旋酶 B．DNA连接酶 C．限制性内切酶 D．RNA聚合酶 解析：检测这种碱基序列改变需将被测基因从DNA上切下来进行扩增，该过程需要限制性内切酶。在扩增后，通过热变性即可使待测基因解旋成单链，与已知碱基序列的贫血病基因制成的DNA探针进行分子杂交，根据形成双链的情况即可测知其碱基序列，此过程无需解旋酶，更不需要形成重组DNA分子所需的DNA连接酶和基因转录所需的RNA聚合酶。据以上分析可知，必须使用的酶是C、限制性内切酶。 答案：C;4、下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B．细菌质粒是基因工程常用的运载体 C．为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体 D．通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA , 用另一种处理运载体DNA 解析：基因工程经常以抗菌素抗性基因为标记基因；质粒是基因工程常用的运载体；通常用同一种限制酶切割目的基因和运载体，以获得相同的黏性末端；受体细胞可以是受精卵，也可以是体细胞。 答案：B;5、利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是 A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白;1、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。五月-20五月-20Thursday, May 28, 2020 2、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。19:49:1619:49:1619:495/28/2020 7:49:16 PM 3、越是没有本领的就越加自命不凡。五月-2019:49:1619:49May-2028-May-20 4、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。19:49:1619:49:1619:49Thursday, May 28, 2020 5、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。五月-20五月-2019:49:1619:49:16May 28, 2020 6、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意