微生物分子生物学检测方法.pptVIP

微生物的分子生物学检测方法 PCR核酸技术 2核酸分子技术 目录 3结语 简介聚合酶链反应(Pc技术自1985年发明以来各种各样以 PCR为基础的DNA序列的扩增和检测方法得到了迅猛发展 各种衍生技术如反转录PCR(RTR) PCR单链构象多态性( PCRSSCP)、限制性片段长度多态性 (RFLP)、随机扩增的多态性DNA技术(RAPD)和重复序列 PCR技术(Rep-PCR)、荧光定量PCR等。其中定量PCR既可 以用于临床感染性疾病的诊断,又可用于监测其疗效,PCR PCR核酸 及其衍生的技术近年来在病原微生物分型研究上得到了广 技术 重复序 随机扩增\列PCR 的多态性技术 DNA技术 免疫 PCR 随机扩增的多态性DNA技术(RAPD)是一种典型PR衍生技术, 在低复性温度下用短任意序列引物(10~15mers)扩增有密切 随机扩增的多态 同源性的基因组DNA序列,模板上任意引物杂交点的数目和位 性DNA技术 置因种的不同株而异,理论上特定株形成特定图谱。反应出不 菌株基因组的DMA特点,从而对他们进行分型 RAPD是目前最简单的DNA分型方法,分辨力高于RFLP,但低于 Rep一PCR,RAP技术的使用范围也非常广,分辨结果也有较好 的实验室再现性,在疾病暴发流行时,PAFD仍是一种分析相关 菌株和排除不相关菌株的良好技术 由于其对引物和DMA浓度、DMA模板质