10.2 车间种子制备.pdf

车间种子制备 车间种子制备 （1 ）生产车间种子制备 种子罐的培养基虽因不同菌种而异 ，但其 原则是要采用易被菌利用的成分如葡萄糖、玉 米浆、磷酸盐等 ，如果是需氧菌 ，同时还需供 给足够的无菌空气 ，并不断搅拌 ，使菌 （丝 ） 体在培养液中均匀分布 ，获得相同的培养条件。 培养物的选择 在生产车间阶段 ，最终一般都是获得一定 数量的菌丝体。 菌丝体比孢子要有利 l 缩短发酵时间 l 有利于获得好的发酵结果 培养基的选择 目 的 金融保险 l为获得一定数量和质量的菌体 ，培养 基的选择应首先考虑的是有利于孢子 的发育和菌体的生长 ，所以营养要比 发酵培养基丰富。 培养基的选择 原料方面 金融保险 l不如实验室阶段那么精细 ，而是基本 接近于发酵培养基 ，这有两个方面的 原因 以蔗糖为原料 麦芽汁 麦汁 糖 2.5—5% 20% NH NO 0.225% 0.11% 4 3 K HPO 0.03% 2 4 MgSO .H O 0.025% 0.025% 4 2 KCl 0.015% 琼脂 2% 种子罐的作用 l 主要是使孢子发芽 ，生长繁殖成菌 （丝 ）体 ，接入发酵罐能迅速生长 ， 达到一定的菌体量 ，以利于产物的 合成。 种子罐级数的确定 l 种子罐级数 ：是指制备种子需逐级 扩大培养的次数。 l 一般 由菌丝体培养开始计算发酵级 数 ，但有 时 ，工厂从第一级种子罐 开始计算发酵级数。 种子罐级数取决于 金融保险 l 菌种生长特性 （如菌种传代后 的稳定 性 ）、孢子发芽及菌体繁殖速度 ； l 所采用发酵罐的容积 l 另外还与发酵罐 中种子培养液 的最低 接种量 （种子液体积/培养液体积 ）以 及种子罐与发酵罐的容积比等有关。 细 菌 生长快 ，种子用量比例少 ，级数也较少 ，二级发酵 酵 母 比细菌慢 ，比霉菌 ，放线菌快 ，通常用一级种子 霉 菌 生长较慢 ，如青霉菌 ，三级发酵 放线菌 生长更慢 ，采用四级发酵 确定种子罐级数需要注意的问题 l 种子级数越少越好 ，可简化工艺和控制 ，减少染 菌机会 l 但种子级数太少 ，接种量小 ，发酵时间延长 ，增 加染菌机会 ，降低发酵罐的生产率 l 虽然种子罐级数随产物的品种及生产规模而定。 但也与所选用工艺条件有关。如改变种子罐的培 养条件 ，加速了孢子发芽及菌体的繁殖 ，也可相 应地减少种子罐的级数 种子罐培养基 种子罐中应采用易被微生物吸收利用的成 分为主 ，同时供给足够的无菌空气 ，最后一级 种子罐培养基还应与发酵罐培养基基本一致。 种子罐接种 l 孢子悬浮液采用微孔接种法 l 摇瓶菌丝体采用火焰保护接种或者压差法 l 种子罐之间采用压差法接种 休息一下