分子生物学6分子克隆[精品].pptxVIP

分子克隆（基因工程）;前言; 50年代末和60年代，相继提出了“中心法则”和操纵子学说，并成功破译了遗传密码。 从而阐明了遗传信息的流向和表达问题 ;基因工程的诞生;基本概念;基本概念;细胞克隆技术：在制备单克隆抗体的B淋巴细胞杂交瘤技术中运用的最为充分。;主要内容;;应用实例;牛、猪胰岛素，免疫反应 化学合成人胰岛素基因 插入E.coli表达载体中?-半乳糖苷酶基因后 融合蛋白 溴化氰水解 混合重建 ;2、用酵母细胞生产乙型肝炎病毒亚单位疫苗;3、生物钢;;目前世界范围内开发的基因工程多肽药物、疫苗、抗体有五百多种 ;理论意义;;一、分子克隆中常用的工具酶;限制性核酸内切酶 ;限制性核酸内切酶的命名;限制酶的分类及特点 ; II型酶切割双链DNA产生3种不同的切口： ⑴在对称轴中心同时切割双链，产生平末端或称钝性末端（blint end），如Hpa I： 5 …GTT▼AAC…3 Hpa I 5 …GTT AAC…3‘ 3 …CAA▲TTG…5 3 …CAA TTG … 5 ? ⑵在对称轴两侧相对位点分别切割一条链。从5 端切割产生5 端突出的粘性末端，如EcoR I： 5 …