基于金黄色葡萄球菌FnBPA和停乳链球菌GapC1-150的多表位疫苗免疫原性研究.pdfVIP

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2020-08-18 发布于江西
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基于金黄色葡萄球菌FnBPA和停乳链球菌GapC1-150的多表位疫苗免疫原性研究.pdf

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目录目录摘要Ⅰ AbstractIII 1 文献综述 1 1.1 引言 1 1.2 奶牛乳腺炎疫苗的研究进展 1 1.2.1 奶牛乳腺炎全菌体疫苗 1 1.2.2 奶牛乳腺炎荚膜多糖疫苗3 1.3 金黄色葡萄球菌疫苗的研究进展4 1.3.1 金黄色葡萄球菌的致病机制4 1.3.2 金黄色葡萄球菌亚单位疫苗4 1.3.3 金黄色葡萄球菌FnBPA 的研究进展6 1.4 链球菌疫苗的研究进展6 1.4.1 链球菌的致病机制6 1.4.2 链球菌亚单位疫苗的研究进展7 1.4.3 链球菌GapC 疫苗的研究进展8 1.5 表位疫苗的研究进展8 1.6 本研究的目的与意义11 2 金黄色葡萄球菌FnBPA 多表位疫苗免疫原性研究13 2.1 材料 13 2.1.1菌株和质粒 13 2.1.2 实验动物 13 2.1.3 主要试剂 13 2.1.4 试剂盒及其他13 2.1.5主要仪器设备 13 2.2 方法 14 2.2.1 多表位疫苗的设计 14 2.2.2 重组多表位肽原核表达载体鉴定 15 I 基于金黄色葡萄球菌FnBPA 和停乳链球菌GapC1-150 的多表位疫苗免疫原性研究 2.2.3 重组多表位肽表达纯化及表位肽合成 15 2.2.4 小鼠免疫接种及攻毒16 2.2.5 小鼠脾淋巴细胞分离17 2.2.6 脾淋巴细胞增殖检测17 2.2.7 细胞因子水平检测17 2.2.8 间接ELISA 法检测血清IgG 18 2.2.9 免疫小鼠器官中细菌定殖检测19 2.2.10 统计分析19 2.3 结果19 2.3.1 重组表位肽质粒鉴定19 2.3.2 重组多表位肽表达及纯化结果20 2.3.3 多表位疫苗诱导的淋巴细胞增殖21 2.3.4 多表位疫苗诱导的特异性细胞因子水平22 2.3.5 多表位疫苗诱导的血清IgG 水平23 2.3.6 免疫小鼠器官中的细菌定殖量24 2.4 讨论25 3 停乳链球菌GapC1-150 多表位疫苗免疫原性研究27 3.1 材料27 3.1.1菌株和质粒27 3.1.2 实验动物27 3.1.3 主要试剂27 3.1.4 试剂盒及其他27 3.1.5主要仪器设备27 3.2 方法27 3.2.1 多表位疫苗的设计27 3.2.2 重组多表位肽原核表达载体鉴定28 3.2.3 重组多表位肽表达纯化及表位肽合成28 3.2.4 小鼠免疫接种及攻毒29 3.2.5 小鼠脾淋巴细胞分离29 II