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- 2020-08-18 发布于山东
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葡萄酒中苹果酸的测定
葡萄酒中苹果酸的测定
原理:
TM
利用MegaQuant (专利技术)测定L-苹果酸需要进行三步酶解反
应,第壹步:于L-苹果酸脱氢酶(L-MDH)的催化作用下,L-苹果
+
酸被烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD )氧化生成草酰乙酸:
(1)L-苹果酸+NAD+(L-MDH)oxaloacetate+NADH+H+
第二步:加入过剩的L-谷氨酸,于谷草转氨酶的作用下,生成L-
天门冬氨酸和2–酮戊二酸
(2)Oxaloacetate+L-glutamate(GOT)L-aspartate+2-oxoglutarat
e
第三步:于心肌黄酶的催化作用下,NADH仍原碘硝基氯化四氮唑
(INT) ,生成甲基-INT
+(diaphorase) +
(3)NADH+INT+H NAD +甲基-INT
生成的甲基-INT的量取决于L-苹果酸的量,甲基-INT的吸光度值
可于505nm下测量。
特异性,灵敏度,测量范围和精确度:
该实验方法是专门用于测定L-苹果酸含量的。
最小可调吸光光度为0.01个吸光单位,
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