19 仝婷婷
探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用
1、实验目的
(1)初步学会探索酶催化特定化学反应的方法。
(2 )探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。
2 、实验原理
淀粉和蔗糖都没有还原性 , 也就是都不能使斐林试剂还原 , 所以都不能与斐
林试剂发生反应。唾液淀粉酶将淀粉水解成的麦芽糖则具有还原性 , 能够使斐林
试剂还原 , 生成砖红色的沉淀。 蔗糖水解产生的葡萄糖和果糖都具有还原性 , 但唾
液淀粉酶不能将蔗糖水解。
试验中可以用菊糖代替蔗糖。这是因为菊糖是由多个果糖分子缩合而成的,
与淀粉同属于多糖,用菊糖与淀粉进行对比实验,更具有说服力。
3 、实验材料
质量分数分别为 3%的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液;质量分数为 2%的新鲜淀
粉酶(化学试剂商店有售)溶液。
4 、试剂与仪器
斐林试剂(也可以用班氏试剂)试管、大烧杯、量筒、滴管、温度计、试管
夹、三脚架、石棉网、酒精灯、火柴。
5 、实验方法与步骤
(1)取两支洁净的试管,编上号,然后向 1 号注入 2mL可溶性淀粉溶液和
2mL新鲜淀粉酶溶液。向 2 号注入 2mL蔗糖溶液和 2mL新鲜淀粉酶溶液。
(2 )轻轻振荡这两支试管,使试管内的液体混合均匀,然后将试管的下半
部浸到 60℃左右的热水中,保温 5min 。
(3 )取出试管,各加入 2mL斐 林试剂(边加入斐林试剂,边轻轻振荡这两
支试管,以便使试管内的物质混合均匀) 。
(4 )将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中 , 用酒精灯加热 , 煮沸并
保持 1min。
(5 )观察并记录两支试管内的变化
6 、注意事项
①做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度。这是因为蔗糖是非还原性
糖,如果其中混有少量的葡萄糖或果糖, 或蔗糖放置久了受细菌作用部分分解成
单糖,则与斐林试剂共热时能生成砖红色沉淀, 使人产生错觉。 为了确保实验的
成功,实验之前应检验一下纯度。 普通的细粒蔗糖往往是由于部分水解而具有一
些还原糖。可用市售大块冰糖,水洗去其表面葡萄糖得到纯净的蔗糖。
②实验中要将试管的下半部浸到 37℃的温水中,因为淀粉酶在适宜的温度
条件下催化能力最强。
③在实验中,质量分数为 3%的蔗糖溶液要现配现用 (以免被细菌污染变质),
取唾液时一不定期要用清漱口,以免食物残渣进入唾液中。
④制备的可溶性淀粉溶液, 一定要完全冷却后才能使用, 因为温度过高会使
酶活性降低,甚至失去催化能力。
⑤实验中如果 2 号试管也产生了砖红色沉淀,可能的原因是:
蔗糖溶液放置的时间过长, 蔗糖被溶液中的微生物分解成还原性的糖, 从而影响
实验效果。 这时应临时配制蔗糖溶液。 另一个可能的原因是试管不干净, 所以实
验之前应将试管用清水再清洗一次,试管编号要醒目。
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⑥实验步骤一定要按要求的程序进行,不可随意改变。
⑦如果实验中, 自己的实验结果与结论上的预期结果不一致, 应再设计实验,
进行进一步的验证或找出问题所在。
7 、实验结果与讨论
1 号管中出现砖红色沉淀, 2 号管无颜色变化。
[ 实验思路拓展 ]
酶的专一性验证
1 、实验目的
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