热量限制通过调控HIF-1α介导的自噬与炎性通路缓解心肌缺血_再灌注损伤.pdf

目 录 中文摘要1 英文摘要4 常用缩写词中英文对照表7 前 言9 热量限制通过调控HIF-1α介导的自噬与炎性通路缓解心肌缺血/再灌注损伤9 1 材料与方法10 1.1 实验动物及分组10 1.2 主要仪器和试剂10 1.3 实验方法12 1.4 统计学处理18 2 结 果18 2.1 热量限制改善小鼠基本生理指标18 2.2 CR 使小鼠术后的心肌梗死面积减小 19 2.3CR 减轻小鼠I/R 后心肌组织的病理损伤20 2.4 CR 改善小鼠I/R 所致的心肌氧化应激损伤21 2.5CR 促进I/R 后心肌组织自噬相关蛋白的表达 22 2.6CR 促进I/R 后心肌组织HIF-1α/Bnip3通路的激活22 2.7抑制HIF-1α可逆转CR 对I/R 心肌的自噬上调 23 2.8CR 可抑制心肌I/R 后的TLR4/NF-кB 信号通路激活24 2.9CR对TLR4/NF-кB 信号通路的激活可被HIF-1α抑制剂所阻断25 3 讨 论26 4 结 论30 参考文献31 综 述34 致 谢42 个人简历43 山西医科大学硕士学位论文 热量限制通过调控HIF-1α介导的自噬与炎性通路缓解 心肌缺血/再灌注损伤 摘 要 研究背景 缺血性心脏病在全球致死性疾病中居于首位，且发病率逐年上升，对缺血性心脏 病的防治已成为全世界共同关注的焦点。目前临床上对于缺血性心脏病的治疗多采用 早期血运重建的方法，但该法会导致不可逆性致死性的心肌损伤—心 肌 缺 血再/ 灌 注 （Myocardial ischemia/reperfusion,MI/R）损伤。因此减轻MI/R 引起的心肌损害 已成为临床治疗中亟待解决的首要问题。诸多研究发现，上调低氧诱导因子-1α （Hypoxiainduciblefactor-1α,HIF-1α）是保护MI/R 的有效措施，而HIF-1α对氧敏感 Caloric 性极高，在常氧条件下极易降解失活。近年的动物和临床研究发现热量限制 （ restriction,CR）通过调控机体的代谢与免疫功能而发挥延长寿命的作用，而且对肝、 CR HIF-1α 肾、脑及卵巢等重要器官具有保护作用。另有研究报道 可以上调 的表达， 因此推测CR 的保护作用可能与HIF-1α有关。 研究发现，适度节食可有效激活自噬，并且HIF-1α/Bnip3通路为一经典的自噬通 CR HIF-1α/Bnip3 / 路。 与 通路是否有关尚不清楚。此外，炎症反应是心肌缺血再灌注 损伤的重要病理特征，本实验室前期研究证实HIF-1α参与TLR4/NF-кB 通路的调控， 抑制TLR4/NF-кB 通路可能是保护心肌的另一有效措施，而CR 与TLR4/NF-кB 通路 之间的关系也不明确。因此，本文旨在从自噬和炎性通路的角度探究热量限制对小鼠 心肌缺血再灌注损伤的影响及可能机制。/ 目的： 1．观察热量限制能否减轻小鼠的心肌缺血再灌注损伤；/ 2．确定热量限制是否通过调控HIF-1α/Bnip3介导的自噬改善心肌缺血/再灌注损 伤； 3．探究热量限制减轻缺血/再灌注心肌损伤是否与上调 HIF-1α进而抑制 TLR4/NF-кB 通路激活有关。 1 山西医科大学硕士学位论文 方法： 1. 实验分组：将8 月龄雄性