欧洲山芥皂苷合成关键酶基因_em_Bv-beta-AS_em_克隆及表达分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2012 ，39 （5）：923 –930 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 欧洲山芥皂苷合成关键酶基因 Bv-beta-AS 克隆 及表达分析 * 魏小春，张晓辉，吴青君，王海平，沈 镝，邱 杨，宋江萍，李锡香 （中国农业科学院蔬菜花卉研究所，农业部蔬菜作物基因资源与种质创制北京科学观测实验站，北京 100081 ） 摘 要： 以能够产生抗虫皂苷的高抗小菜蛾资源 G 型欧洲山芥（ Barbarea vulgaris R. Br. ）B44 为材 料，利用 RACE 技术克隆出皂苷合成关键酶 beta –香树脂合成酶的基因（ Barbarea vulgaris beta-amyrin synthase，Bv-beta-AS）。该基因编码区序列长为 2 289 bp （GenBank 登录号 JQ172795 ），推导其编码 762 个氨基酸； 在基因组水平上长度为 4 107 bp （GenBank 登录号 JQ172796 ），含有 15 个内含子。 Bv-beta-AS 编码的氨基酸具有 beta–香树脂合成酶基因家族的保守序列， 即 DCTAE 序列和 QW 特征序列， 氨基酸多 序列比对和进化树分析表明，该基因与拟南芥 beta–香树脂合成酶基因的相似性最高，为 74%。利用荧 光定量 PCR 对欧洲山芥在小菜蛾诱导下该基因的表达进行研究，结果表明，该基因受虫害诱导时上调表 达，但是上升到 12 h 达顶峰后随时间推移呈回归的趋势。从序列特征和表达模式上推测， Bv-beta-AS 可 能是抗虫皂苷合成途径的一个关键酶的基因。 关键词： 欧洲山芥；小菜蛾；皂苷； beta –香树脂合成酶；克隆；荧光定量 RT-PCR ；抗虫 中图分类号： S 63 ；S 436.341.2+4 文献标识码： A 文章编号： 0513-353X （2012 ）05-0923-08 Cloning ，Characterization and Real-time RT-PCR Analysis of a Key Gene beta-Amyrin synthase for Saponin Biosynthesis in Barbarea vulgaris WEI Xiao-chun ，ZHANG Xiao-hui ，WU Qing-jun ，WANG Hai-ping ，SHEN Di ， QIU Yang ， SONG * Jiang-ping ，and LI Xi-xiang （Institute of Vegetables and Flowers ，China Academy of Agricultural Sciences ，China Academy of Agricultural Scien