多肽金团簇的构建及其在细胞核成像与抗菌中的应用.pdfVIP

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2020-08-20 发布于江苏
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多肽金团簇的构建及其在细胞核成像与抗菌中的应用.pdf

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符号说明 Au NCs: Au nanoclusters, 金纳米团簇 CCK-8: Cell Counting Kit-8 试剂盒 DAB: Diaminobenzidine, 二氨基联苯胺 DAPI: 4,6-diamidino-2-phenylindole, 4,6-二脒基-2-苯基吲哚 DLS: Dynamic Light Scattering, 动态光散射 DMEM: Dulbeccos Modified Eagle Medium DMEM 培养基 DMSO: Dimethyl Sulfoxide, 二甲基亚砜 FBS: Fetal Bovine Serum, 胎牛血清 FT-IR: Fourier transform infrared spectroscopy, 傅里叶变换红外光谱 GSH: Glutathione, 谷胱甘肽 HRTEM: High Resolution Transmission Electron Microscopy, 高分辨透射电镜 ICP-MS: Inductively Coupled Plasma Mass spectrometry, 电感耦合等离子体质谱 LB: Luria-Bertani 培养基 OD: Optical Density, 光密度 PBS: Phosphate Buffer Saline, 磷酸缓冲盐溶液 RPMI: Roswell Park Memorial Institute RPMI-1640 培养基 SA: S.aureus, 表皮金黄色葡萄球菌 TMB: 3,3,5,5-Tetramethylbenzidine, 3,3,5,5- 四甲基联苯胺 UV-Vis: Ultraviolet and Visible Absorption Spectra, 紫外可见吸收光谱目录中文摘要 I Abstract III 1.前言 1 1.1 金纳米团簇 1 1.2 金纳米团簇的制备与结构2 1.2.1 金纳米团簇的制备2 1.2.1.1 基于有机小分子化学合成2 1.2.1.2 蛋白质为模板合成3 1.2.1.3 多肽作为模板合成5 1.2.2 金纳米团簇的结构7 1.3 金纳米团簇的应用8 1.3.1 细胞成像8 1.3.2 生物体组织成像9 1.3.3 生物检测分析 10 1.3.4 抗肿瘤治疗与抗菌 13 1.4 课题研究目的与意义 15 2 材料与方法 17 2.1 试剂与仪器 17 2.1.1 实验试剂 17 2.1.2 实验仪器 18 2.2 SV-Au NCs 的合成及对细胞核多模式成像 18 2.2.1 不同荧光发射的金纳米团簇的合成 18 2.2.1.1 最佳反应条件的探索 18 2.2.1.2 金纳米团簇的最佳反应条件 19 2.2.2 金纳米团簇的表征20 2.2.3 TMB 测定金纳米团簇的类过氧化物酶活性20 2.2.4 细胞培养20 2.2.4.1 冻存细胞的复苏20 2.2.4.2 细胞的培养与传代21 2.2.4.3 细胞的冻存21 2.2.5 金纳米团簇的毒性21 2.2.6 金团簇的细胞摄取21 2.2.7 金团簇的靶向细胞核研究22 2.2.7.1 探索最佳孵育浓度22 2.2.7.2 探索最佳孵育时间22 2.2.7.3 最佳孵育条件22 2.2.8 DAB 法测定金团簇染色细胞核的浓度依赖性和时间依赖性23 2.2.9 不同成像模式下细胞核成像效果的对比23 2.3 CCY-Au NCs 的合成及抗菌性研究23 2.3.1 金团簇的合成23 2.3.2 金团簇的表征23 2.3.3 CCY-Au NCs 的稳定性研究24 2.3.4 金团簇的浓度测定24 2.3.5 CCY-Au NCs 细胞毒性研究24 2.3.5 细菌培养24 2.3.6 金团簇的体外抗菌研究25 2.3.7 细菌摄入金团簇量检测25 3.结果与分析26 3.1 基于SV 多肽合成金团簇及细胞核多模式成像26 3.1.1 金团簇的合成26 3.1.2 金团簇形貌表征27 3.1.2 紫外可见光谱与红外光谱分析28 3.1.3 金团簇荧光光谱29 3.1.4 金团簇细胞毒性与靶向细胞核荧光成像29 3.1.5 金团簇的类过氧化物酶活性33 3.1.6 DAB 法标记细