解淀粉芽孢杆菌SDTB009的分离鉴定及其对番茄枯萎病的防治研究.pdfVIP

符号说明 CFU:Colony-formingunits,菌落形成单位 SEM:ScanningElectron Microscope,扫描电子显微镜 PSA:Potato SaccharoseAgar, 马铃薯蔗糖培养基 PDA:PotatoDextroseAgar, 马铃薯葡萄糖培养基 LB:Lysogeny Broth,LB培养基 ddH o:DoubleDistilledWater,双蒸水 2 PTA:SodiumPhosphowolframate,磷钨酸钠 V-P:VogesProskauerreaction,V-P反应 PCR:PolymeraseChain Reaction, 聚合酶链式反应 Aglient 6545Q-TOF LC/MS: Aglient 6545Q-Time of flight Liquid Chromatograph Mass Spectrometer, 安捷伦6545型精准质量数四级杆-飞行时间串联质谱仪 HPLC:High PerformanceLiquid Chromatography, 高效液相色谱法 目录 中文摘要Ⅰ 英文摘要Ⅲ 1前言1 1.1番茄枯萎病1 1.1.1病原微生物特性1 1.1.2 发病症状2 1.1.3番茄枯萎病病原菌的侵染、传播2 1.1.4 番茄枯萎病防治现状3 1.2 生防芽孢杆菌4 1.2.1营养和空间位点竞争5 1.2.2 分泌抗菌物质6 1.2.3 溶菌作用6 1.2.4 诱导植物抗病性7 1.2.5 芽孢杆菌应用现状及问题7 1.2.6解淀粉芽孢杆菌应用情况及抗病机理9 1.3生物防治与化学防治协同应用10 1.4 脂肽物质11 1.4.1结构与分类11 1.4.2 脂肽物质的抑菌机制12 1.4.3脂肽物质分离纯化13 1.5本研究的目的和意义14 2材料与方法15 2.1试验材料15 2.1.1供试病原菌15 2.1.2 供试培养基15 2.13供试药剂和品种15 2.2 试验方法15 2.2.1 目标病原菌分离、纯化、鉴定15 2.2.2 生防芽孢杆菌的分离、筛选、纯化16 2.2.3生防细菌SDTB009鉴定16 2.2.4 SDTB009 发酵液抑菌活力测定 17 2.2.5苯醚甲环唑室内毒力测定17 2.2.6生物相容性测定18 2.2.7 室内温室盆栽试验18 2.2.8大田试验18 2.2.9 扫描电子显微镜观察解淀粉芽孢杆菌SDTB009对病原菌菌丝体的作用19 2.2.10 SDTB009抑菌物质分析19 2.2.11脂肽物质分离鉴定20 3 结果与分析21 3.1生防菌筛选21 3.2 SDTB009菌株的鉴定及其生理生化特性22 3.3 SDTB009对尖孢镰刀菌番茄专化型的室内抑制活性25 3.4 苯醚甲环唑对病菌菌丝室内毒力26 3.5 SDTB009对菌丝体作用的超微结构观察结果26 3.6 室内生物相容性27 3.7 SDTB009 防控番茄枯萎病的温室盆栽试验结果27 3.8SDTB009 防控番茄枯萎病的田间药效试验结果28 3.9 SDTB009 中的脂肽物质基因29 3.10 脂肽粗提物对目标病原菌电导率的影响29 3.11TOFLC/MS分析结果29 4讨论31 4.1生防菌应用于防治番茄枯萎病的可行性31 4.2 化学药剂与生防菌制剂协同防治的可行性分析32 4.3生防菌生防作用机制32 5主要结论和展望35 5.1主要结论35 5.2 试验创新点35 5.3 不足之处及未来展望35 参考文献37 致谢47 攻读学位期间发表论文情况48 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 我国是世界上番茄种植面积和产量最大的国家。近年来，番茄土传病害日益严 重，已成为制约番茄生产的重要因素，番茄枯萎病是其中最为典型、最难防治、最为 普遍的病害之一。常用的防控手段包括改良农业措施、物理方法、施用化学药剂等， 防治效果皆不理想。生防芽孢杆菌因其能够产生抑制病原菌的脂肽物质，芽孢杆菌能 够产生环境适应能力较强的芽孢，芽孢可以在多种较为恶劣的环境下存在并发挥作 用，以及芽孢杆菌具有多种不同的作用方式，成为生物防治策略中非常重要的