PCR仪的扩增原理讲课稿.pptVIP

PCR 仪的扩增原理 生科四班 崔文强 PCR 仪是什么 ? 简单的说， PCR 仪就是利用 DNA 聚合酶对特定基因做体外或试管内 In Vitro 的大量合成，基本上它是利用 DNA 聚合酶进行专一性的连锁复制。 目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿之一千亿倍。 PCR 技术 以 DNA 为模本 的反应 以 mRNA 为模 本的反应 。。。 PCR 反应 高温变性： 90 ～ 95 ℃ 低温退火： 50 ～ 65 ℃ 室温延展： 70 ～ 75 ℃ PCR 仪器 普通 PCR 仪 梯度 PCR 仪 原位 PCR 仪 实时荧光定量 PCR 仪 PCR 仪的控温系统 PCR 仪的控温系统就是它的核心系统，温度控制的精度非常重要，直接 影响 PCR 实验的成功与否，较大的温度偏差会导致 PCR 实验失败。近年 来的研究表明 ，提高 PCR 热循环中 3 个温区之间的升降温速率，不仅能 够缩短整个 PCR 扩增过程所需时间，而且特异性更好。因此， PCR 反应 中的温度控制不仅涉及升温降温和恒温过程，还要求温度控制的精度高， 超调少，调节时间短 。 功率放大电路 ? 由于数字信号处理器产生的 PWM 波功率太小不能驱动加热制冷片，所 以利用高端和低端驱动器组成的 H 桥功放电路放大 PWM 波 ? PWM ：利用微处理器的数字输出来对模拟电路进行控制的一种非常有 效的技术 功率放大电路 温度传感电路 ? 采用高精度 铂电阻器 pt100 作为温度传感器， pt100 采用三线制接法，三 线制传感器要求引出的三根导线截面积和长度均相等，测量电路一般使 用不平衡电桥， pt 电阻器作为电桥的一个桥壁电阻，其余两根分别接到 pt 电阻器所在的桥壁和与其相等的桥壁上，运用运算放大器工作在线性 区域的特点，将恒流源原理运用到 桥式测温，设计了一种消除非线性误 差的电桥电路 。 温度传感电路 半导体加热制冷片 ? 半导体加热制冷片采用直流电流，通过改变直流电流的极性来实现加热 或制冷，工作原理是：当一块 N 型半导体材料和一块 P 型半导体材料联 接成电偶对时，在这个电路中接通直流电源后，就会产生能量的转移， 电流由 N 型元件流向 P 型元件的接头吸收热量，成为冷端；由 P 型元件向 N 型元件的接头释放热量，成为热端。单片的加热制冷片由两片陶瓷片 构成，其间有 N 型和 P 型的半导体材料 碲化铋 ，这些半导体元件在电路 上以串联形式联接组成。 热盖 ? 恒温在 100 ℃以防止反应液的蒸发。反应时热盖与各样品管紧密接触， 对各样品管均匀施压，使得温度传递匀速均匀，而且方便省事，无污染。 它比丝状电阻器结构提供更均匀的热场，更短的加热时间和更快的响应 时间，功率负荷低，使用寿命更长。 温度控制系统硬件总体框图 ? A/D ：将数字信号转换成模拟信号 功率放 大电路 A/D 加热制 冷技术 驱动电路 信号放 大电路 变温室 温度检 测电路 输出 电路 核 心 芯 片