神经细胞胞体外培养的方法及的应用.pptVIP

神经细胞体外培养 方油及应用 田东萍 汕大医学院病理教研  神经细胞体外培养的历史 神经组织的体外培养方法是由 Harrison,于1907年首 创的。 ■由于该方法具有简化细胞生化环境、明确生长条件、 便于施加实验因景及容易狭得活体直接观测结果等优 点,因而已成为研究神经系统绪构和功能的有效手段。 九十余年来,这项技术已从组织块(或植块)培养 ( explant culture)发展到分离细胞培养 ( dissociated cell culture),并逐渐与多种现代技 米结合起率,在神经科学各领域墩捍了量大作用。  组织块培养→分离细胞培养→ 甚至单一型细胞培养  神经组织的植块培养法 悬滴培养方法 单盖玻方法 双盖玻方法1925 改良双盖玻方法 培养物: CNS灰质、白质、外周神经节或神经小段 突起 非神经元外伸  优点 所需培养液量少,可反应组织代谢中 微量生化改变 保留了植块内组织特征  不足 培养空间小,O2CO2供少 培养空间湿度难以控制,水分会蒸发 密封手续繁杂,不利更换培养液,难 以观察单个神经元生长。  神经元的分离细胞培养方法 1956年, Nakai首创了神经组织的分离培养方法 材料来源:胚胎动物神经组织 神经元增殖发生于胚胎期 形态学分化和化学分化程度低,体外存活强, 成熟后