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专题2细胞工程 动物细胞工程 ◆动物细胞培养 ◆动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物细胞融合 ◆单克隆抗体制备  其宅动物细胞工程的基础 动物细胞培养 动物 细胞|丿核移植 工程 常用 动物细胞融合 技术 单克隆抗体技术  本节内容: 、动物细胞培养 核移植技术  、动物细胞培养的应用和概念 1、概念:动物细 胞培养就是从动物 有机体中取出相关 的组织,将它分散 成单个细胞,然后 放在适宜的培养基 中,让这些细胞生 长和增殖。 2、原理:细胞增殖 图2-15用培养的人细胞构建的人造皮肤  3、过程 图示 胚胎或幼龄动物器官组织 幼龄动物 ①原代培养 取出组织 定义:人们通常将 剪碎 动物组织消化后的 胰蛋白酶处理 初次培养称为原代 分散成单个细胞 剪碎组织 培养 细胞悬液 原代培养转入培养瓶内培养 (贴壁生长长成单层细 细胞培养 胞。有接触抑制现象)。  强调一:细胞贴壁过程 ■细胞贴壁:在培养瓶悬液中分散的细胞很快就 贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁 30分钟后 细胞运动2 小时后 24小时后 ■培养瓶或培养皿壁要求:表面光滑、无毒、易 于贴附。  强调二:接触抑制 正常细胞 ■当贴壁细胞分裂生 长到表面相互接触时, 细胞就会停止分裂增 平面观 殖,这种现象称为细 肿瘤细胞 胞的接触抑制。 失去接触抑制  ②传代培养 定义: 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下 来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释, 并从原培养瓶內转接到新的培养瓶内,这 个过程称传代培养.(分瓶培养的过程)  强调:细胞系、细胞株(了解即可,老课本体系) ▲细胞株:传代细胞一般能传到40-50代, 遗传物质一般不会发生改变,叫细胞株。 ▲细胞系:传代50代以后不能再传下去, 部分细胞遗传物质发生了改变,能连续传 代,获得不死性,叫细胞系。  3、总结:动物细胞动物胚胎或幼龄动物 培养过程 的组织、器官 剪碎用胰蛋白酶处理 为什么用胰蛋白酶处理?分散成单个细胞 加培养液稀释 原代培养特点:细胞贴壁、配置细胞悬液原 接触抑制 转入培养瓶」培遗细 传胞 传代10代以内,還传物质不改变】分瓶培养 养物 保持正常二倍体核型。 传代10-50代左右,增长缓慢以 10代细胞传 未 改般 至于完全停止,部分绷胞核型可 代变说 能发生变化(遗传物质可能改变40-50代细胞培 继续传代培养少部分细胞获得不 养 已遗细 死性,细胞突变,遗传物质已经 改传胞 改变,等同于癌细胞。 无限传代 变物系 质