体内药物分析的常用生物样品处理方法与方法学验证.ppt

体内药物分析的样品处理 和方法学验证 DANGER BIOLOGICAL HAZARD  1.为什么要对生物样品进行处理? CO)TOtOIIG 2有哪些生物样品? 3有哪些样品处理方法?各自的特点。 4如何对分析方法进行验证? 5有哪些参考标准?  处理的目的 生物样品进行前处理的目的在于 1.药物进入体内后,经吸收、分布、代谢,然后排出体 外。在体液、组织和排泄物中除了游离型(原型)药物之 外,还有药物的代谢物、药物与蛋白质形成的结合物、以 及药物或其代谢物与内源性物质,如葡萄糖醛酸、硫酸形 成的葡萄糖醛酸甙、硫酸酯缀合物等多种形式存在,需要 分离后测定药物及代谢物。  2.生物样品的介质组成比较复杂。如在血清中既含有高 分子的蛋白质和低分子的糖、脂肪、尿素等有机化合物, 也含有Na+、K+、Cl等无机化合物。这些成分会严重影响 测定的准确性和灵敏度,同时会污染仪器。因此,为了保 护仪器,提高测定的灵敏度,保证检测结果的准确性和可 靠性,必须对样品进行前处理。  Cablibration Sample Instrument 30% 6% Chromatograph 色谱分析的误差来源 Introductio Contamination 19% II 6%以上精力和花费用在样品前处理上  二、生物样品的种类 生物样品包括各种体液和组织,但实际上最常用的是 比较容易得到的血液(全血、血浆、血清)、尿液、粪便 唾液。在一些特定的情况下选用乳汁、脑脊液等。 血液的组成 液的主要组成可概括如下 白蛋白 血深日球蛋白 水(91%-92%》 纤维蛋自限 血 电解质 HPOi. so2 养物质 小分子有机物1代谢终产物 血细 气体;O2.coz (40%-50% 白细  1全血 全血不易保存,且血细胞中含有 更多的干扰物质,影响测定,故 很少采用全血测定药物浓度。仅 适用于血浆药物浓度太低或者血 浆药物浓度波动大,且难以控制 的药物如:环孢霉素A  2血浆 测定血中药物浓度通常是指测定血浆或 血清中的药物浓度,而不是指含有血细 胞的全血中的药物浓度 将采取的血液置含有抗凝剂(如:肝素、 EDTA)的试管中,混合后,3000至4000 血浆层 r/min离心,分离血细胞,上清液即为血 浆  血浆蛋白约7% 葡萄糖、氨基酸、无机盐等约3% 水约90% 血浆中含有的物质种类和比例  3血清 血清是在采血后不加任何抗凝剂,于室温下静置15 30min,待其自然凝结后,离心,分离出上清液。血清 颜色较血浆更浅,成分较血浆少了大部分的纤维蛋白, 更易进行处理,且血浆及血清中的药物浓度测定值通常 是相同的。