培养基及其的设计制备优化.ppt

第三讲(2011.9.21) 第四章培养基及其设计、制备、优化 第一节培养基的类型 第二节发酵培养基的成分及来源 第三节发酵培养基的设计和优化  5、生长因子、前体和产物促进剂 51生长因子 从广义上讲,凡是微生物生长不可缺少而细胞自身不 能合成的微量的有机物质,如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生 素等均称生长因子。 有机氮源是这些生长因子的重要来源,多数有机氮源 含有较多的B簇维生素和微量元素及一些微生物生长不可 缺少的生长因子 如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷 型,以生物素为生长因子,生长因子对发酵的调控起到重 要的作用。  5.2前体 前体指某些化合物加入到发酵培养基中,能直接彼微生 物在生物合成过程中合成到产物物分子中去,而其自身的结 构并没有多大变化,但是产物的产量却因加入前体而有较大 的提高。如:青霉素G生产添加苯乙酸,红霉素生产添加丙 酸丙醇等,合成L丝氨酸添加甘氨酸。 cM∞ H CoDH 青霉素:分子量356 苯乙酸:分子量136  用法:前体使用时普遍采用流加的方法(采取少量多次) 前体一般都有毒性,浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸,一般基础料中仅仅添加0070 前体相对价格较高,添加过多,容易引起挥发和氧化, 流加也有利于提高前提的转化率。  53产物促进剂 所谓产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物,又 非前体,但加入后却能提高产量的添加剂。 微生物 酶活力增加倍数 纤维云酶 许多真菌 庶酶 许多真苗 3葡聚糖 讦多真菌 木聚 许多真菌 粉酶 讦多真菌 唱萬 干多真菌 右旋唐酶绳状告霉QM2 昔鲁兰酶。产气杆菌QMB151.1 大豆洒精提蛋白酶 米由霉 泡盛曲霉 植酸仄 蛋白酌。曲霉、桔音霉.枯草 0.01-0.3%) 杄菌、假丝酹母。 冼净剂蛋白酶 栖土曲r  促进剂提高产量的机制还不完全清楚,其原因是多方 面的。 有些促进剂本身是酶的诱导物, 有些促进剂是表面活性剂,可改善细胞的透性,改善 细胞与氧的接触从而促进酶的分泌与生产 也有人认为表面活性剂对酶的表面失活有保护作用; 有些促进剂的作用是沉淀或螯合有害的重金属离子。  、水 对于发酵工厂来说,恒定的水源是至关重要的,因为在 不同水源中存在的各种因素对微生物发酵代谢影响甚大 水源质量的主要考虑参数包括pH值、溶解氧、可溶 性固体、污染程度以及矿物质组成和含量 对于酿造行业,水的重要性不言而喻 对于常规发酵,可靠、持久,能提供大量成分一致清洁的 水  第三节发酵培养基的设计和优化 参照前人所使用的较适合某一类菌种的经验配方,再结合 所用菌种和产品的特性,采用摇瓶、玻璃罐等小型发酵设 备,按照一定的实验设计和实验方法选择出较为适合的培 养基  1、培养基成分选择(设计)的原则 11根据微生物的营养需求配制培养基 12注意培养基营养物质的浓度和配比 如蔗糖适当浓度是营养,高浓度则成为抑制因子。 注意培养基的CN对发酵的影响。如谷氨酸的发酵, C/N为4:1时,菌体大量繁殖,酸积累少,当CN为3: 1时产生大量的谷氨酸 13调节适当的物理化学条件 131pH:发酵过程的酸碱度会发生变化,一般可考虑  加入缓冲剂,如:KH2PO4K2HPO4 132渗透压和水分活度(Aw):等渗溶液适宜微生物 的生长。Aw表示微生物在天然环境中可实际利用的自 由水或游离水的含量。AW=P/Po,即某溶液的蒸汽 压(P)与纯水的蒸汽压(P0)的比值。各种微生物 的生长范围AW:0998~06,设计培养基时应考虑 到AWG生长的最小水分活度一般比G+高,表明通常 G+比G有较高的内部渗透压,酵母与G+类似,丝状 真菌范围大。