（优质课件）HIV抗体初筛试验.pptVIP

检测方法 必须按照试剂盒说明书（sop）中规定的要求进行操作 包括进行检测的实验条件如阳性对照和阴性对照的设置、试剂、标本加样量、孵育时间、反应温度、洗涤程序和次数等 标本质量 冷冻样品实验前需解冻并混匀，血清或血浆样品如溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况，可能会对试验产生影响 *  加样 移液器 ( 包括单头和多头移液器 ) 是实验室中重要的基本器具，一年至少校准一次 准确加到微孔板底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡，加入后及时放入孵箱 检测方法 * 检测方法 孵育 孵育的温度要控制好，时间要掌握好，严格按照说明书操作 注意封板，避免蒸发 反应板不宜叠放，反应板至水面下的1/3处，以保证各板的温度都能迅速平衡，保证温度的均一性 * 检测方法 洗涤 各种试剂盒的洗液不要混用。按要求稀释，洗液如果结晶应待其融解后配制 检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象 按孔的大小调节好洗液的量 孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好，手工洗板防止洗液在孔内形成气泡 * 检测方法 显色与终止 显色剂不用过期显色剂 加终止液时应避免产生气泡。如产生较多气泡，则会导致假阳性 酶标仪测定 * 每天（每次） 核对酶标仪滤光片波长 查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象 每周 清洁仪器表面，保护光学零件，不沾灰尘 每月 洗涤时检查各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求，这是保证各孔洗涤均衡一致的前提 ℃ ℃ ℃ ELISA 洗板机与酶标仪 (推荐方法) * 结果报告 分析结果及发出检测报告前，应在试剂盒和外部质控品结果满足要求的前提下，对样品进行分析，试剂盒及外部质控品不合格，样品需要重新检测，复核人对检测结果进行仔细复核并对结果提出结论，签发人对试验结论进行审核、分析、总结、签字 * 结果报告 筛查阴性样本，出具具有法律效用的正式报告,血清建议保存1-2个月 筛查阳性样本，及时送确证实验室。必要时可出具HIV抗体待复查报告 筛查实验室不得保存阳性样本，需转运至确认实验室 筛查实验室不可以出具HIV抗体阳性报告 * 结束语 严谨的设计，优质的试剂，正确的操作和良好的仪器是保证ELISA必要条件 严格遵照规定操作，必能得出准确的结果 * * HIV抗体筛查试验 * HIV抗体检测的目的和要点 目的 诊断 血液筛查 监测 要点 根据目的选择检测方法及检测策略 ! 严格遵守实验室SOP 筛查试验阳性—需做确证试验 筛查试验阴性—不应做确认试验 筛查及确证试验均应做好咨询工作 * HIV抗体筛查试验 试剂 储存温度 效期 样品 血清 血浆 全血 方法 酶联免疫吸附试验（ELISA 化学发光或免疫荧光实验 快速检测(RT)及其它检测试验 明胶颗粒凝集试验 （PA） 免疫渗滤试验 免疫层析试验 免疫胶体金法（硒） * 免疫胶体金法 阴性 质控区（C）出现红色反应线 阳性 质控区（C）出现红色反应线 检测区（T）出现红色反应线 无效 质控区 （C）未出现红色反应线 HIV抗体筛查试验 * HIV抗体筛查试验 酶联免疫吸附试验（ELISA） 方法类型 双抗原夹心法测抗体 双抗体夹心法测抗原 捕获法测抗体 间接法测抗体 竞争法测抗原\抗体 * 用于检测HIV抗体的ELISA法 第一代：使用