多克隆抗体的制备 实验报告.docVIP

实验二 多克隆抗体的制备 实验目的和要求： 1、掌握多克隆抗体制备方法 2、多克隆抗体纯化、保存及效价测定 实验内容： 1、猪链球菌（2、7、9型）分型血清制备 2、猪链球菌（2、7、9型）分型血清效价测定 实验方法和步骤： （一）相关免疫血清的制备 2014年11.25达，2014年12.2 注射 2.0ml抗体 1、实验动物分组：成年家兔 4组，2只/组 2、适应新环境之后，进行免疫：加入之前实验制备的猪链球菌全菌抗原，2ml/只，首免-2w后二免-4w后三免 3、采血：首免后2w-4w-6w采血，耳缘静脉采血3mL 5、分离血清之后，-20℃保存备用 （二）琼脂扩散实验： 材料和试剂1、PH8.6，0.1M巴比妥——巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g，巴比妥 1.84 g，硫柳汞 100 mg（防腐剂），蒸馏水加热溶解并定容至500ml。2、1%预复琼脂（或琼脂糖）1g琼脂（或琼脂糖）加蒸馏水100ml溶化即可。3、1%琼脂糖凝胶1g琼脂糖加50ml蒸馏水置水溶中煮沸溶解或用与波炉加热溶解（注意不要溢出且注意加入蒸发的水），然后再加入50ml上述巴比妥缓冲液混匀，置4℃保存备用。4、抗原及相应免疫血清。 操作步骤 预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复琼脂用滴管加玻板上，使之能将表面覆盖即可，放于温箱内干燥（或自然干燥），即可用以制备凝胶板。2．凝胶板的