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- 2020-08-31 发布于广东
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?瘤细胞悬液接种法 每次接种的动物数量较多时可采用此法。具体方法是:无菌操作取出瘤块,将数个瘤块混合后剪成小块,放入玻璃匀浆器中,加无菌生理盐水向一个方向转动研磨后,经滤网过滤,加生理盐水稀释成1:3~1:4(肿瘤g:生理盐水ml)的瘤细胞悬液,用台盼兰染色法计数活细胞数,用1ml注射器注射到接种部位,每个接种点接种0.2ml(一般含1×106~1×107个细胞数)。通常接种到腋窝皮下,每只动物可选用多个接种点。 * ?瘤细胞悬液接种法 将对数生长期细胞用0.25%胰蛋白酶消化脱壁后,用PBS或者生理盐水以1000r/min离心10min,洗涤2次,洗掉细胞中胰蛋白酶和培养液中血清等成分,用台盼蓝拒染法计数活细胞数,用生理盐水将肿瘤稀释成一定浓度的细胞悬液,细胞悬液置于冰上,使用1ml注射器在每个接种点接种0.2ml(含1×106~1×107个细胞),应尽快注射到接种部位。 * 2.腹水瘤 * 肿瘤细胞的冻存与复苏 对肿瘤细胞或瘤株进行冷冻保存可以使其得以长期使用,防止退化或变异,保存不同代细胞的特征。一般在液氮中保存1~2年,细胞存活率可达80%~90%。 1.冻存方法:取对数生长期增殖旺盛的细胞,胰蛋白酶消化、离心、
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