食品微生物检验技术 菌落总数的测定 7.1微课视频.ppt

《食品微生物检验》 重庆化工职业学院 环境与质量检测学院 《食品质量与安全》精品课程系列 主讲人：袁莹 细菌检测的意义 细菌总数是指食品检验经过处理，在一定条件下（培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等）培养后，所得1mL（g）检验中所含细菌菌落总数。 食品菌落总数可作为判定食品被污染程度的指标，同时，也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 一、实验目的 1、学习食品中细菌总数测定的技术方法； 2、掌握食品细菌总数的结果报告方式。 1、仪器：电热恒温培养箱、恒温水浴锅、托盘天平、电炉、灭菌吸管、灭菌三角瓶、灭菌平皿、灭菌试管、试管架、酒精灯、75%酒精棉球、记号笔； 2、试剂：75%乙醇、生理盐水或无菌水、营养琼脂培养基等 二、实验材料 1、菌落总数检验程序 三、实验方法 （1）以无菌操作，将检样25mL放于含有225mL灭菌蒸馏水水的三角锥瓶中，摇匀，做成1：10的均匀稀释液。 （2）另取1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌水（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。 （3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。 2、检样稀释及培养 （4）根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，本次实验分别选取1：10；1：100；1：1000三个稀释液，以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。 （5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至460C营养琼脂培养基注入平皿15ml~20mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。 （6）等琼脂凝固后，翻转平板，置（36±1）0C恒温箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数。 （1）菌落计数方法 做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。 3、菌落计算方法 （2）菌落计数的报告 酱油中细菌总数结果记录 稀释度 10-1 　10-2 　10-3 平板 1 2 1 2 1 2 菌落数 ＞300 ＞300 35 37　 2 未检出 平均菌落数 36 　 细菌总数 　3.6×103（cFu/mL） 谢谢观看 片头，PPT背景+音乐 * 解说词： 大家好！今天我们一起来以酱油为例学习一下食品中细菌总数的测定，以及结果的记录及计算。（老师出镜+字幕+本页PPT） 解说词： 细菌总数是指食品检验经过处理，在一定条件下（培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等）培养后，所得1mL（g）检验中所含细菌菌落总数。食品菌落总数可作为判定食品被污染程度的指标，同时，也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 * 讲解词: 本次实验目的有：1、学习食品中细菌总数测定的技术方法；（字幕+图片） 2、掌握食品细菌总数的结果报告方式。（字幕+图片） 讲解词: 下面我们一起看看本次实验所需材料：（字幕+本页PPT内容） 脚本字幕：所需仪器有：电热恒温培养箱、恒温水浴锅、托盘天平、电炉、灭菌吸管、灭菌三角瓶、灭菌平皿、灭菌试管、试管架、酒精灯、75%酒精棉球、记号笔；所需试剂有：75%乙醇、生理盐水或无菌水、营养琼脂培养基等。 讲解词: 三、实验方法（字幕+本页PPT） 1，菌落总数检验程序 检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个适宜稀释度各以1ml之量分别入灭菌平皿内→每皿内加入460C适量营养琼脂→菌落数→报告（字幕+检验程序图片） 讲解词: 2，酱油样品的稀释及培养：（字幕+本页PPT标题） 切换到拍摄视频。脚本字幕： （1）以无菌操作，将检样25mL放于含有225mL灭菌蒸馏水水的三角锥瓶中，摇匀，做成1：10的均匀稀释液。 （2）另取1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌水（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。 （3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管，振摇试管混合均匀，做成1：1000的稀释液。 讲解词: 切换到拍摄视频。脚本字幕： （4）根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，本次实验分别选取1：10；1：100；1：1000三个稀释液，以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每