用于核酸操作工具酶.pptVIP

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  • 2020-09-02 发布于福建
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限制性核酸内切酶( restriction endonucleases 1、限制性内切酶及其特点 识别双链DNA分子中的特定序列,并由此 切剖DNA双链的核酸内切酶,简称限制酶 限制酶识别序列长度:4-8bp 5-GTTLAACI3 3■C■A■A TTG 限制性内切酶 CUT 识别 Eco RI SLAHATHT-CK特定的 HTTHA-AG减基序列 CUT Hind Ill CUT 主要存在于原核细黄中,帮助细茵限制外来 DNA的入侵。 细茵中还存在一种修饰酶,其作用是修饰限制 酶作用部位的结构,使其自身的DNA不被限制 酶分解。如把DNA中的A甲基化为6NCH3A。 这种现象称为细菌限制修饰条统。 Werner Arber于1962-1968年发现, 1968年分离到l型限制酶。 大肠杆菌细胞中存在两种DNA甲基化酶: 即DNA腺嘌呤甲基化酶(Dam酶):作 用:在5GATC3序列中的腺票黔N位引 入甲基,受其影响的酶有Bc!、Mbol EOR等,但 BamHI、Bg山、Sau3A|不受 影响。 DNA胞密啶甲基化酶(Dcm酶):在 5 CCAGG3’或5 CCTGG3”序列中的胞密 啶C位上引入甲基,受其影响的酶有 EcoR等。 表1对甲基化敏感的限制性内切酶 限制酶 识别序列* 甲基

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