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ABO血型鉴定正反定型试验方法 一、试剂和材料： （一）单克隆抗 A、抗 B 试剂（由试剂厂家提供） （二）显微镜、载玻片 （三） A 型、B 型红细胞（本实验室制备的 5%混悬液） （四） EDTA 抗凝的待测红细胞全血 （五）竹签 二、方法（玻片法） ： （一）正定型： 1. 在一块干净的玻片上，间隔一定距离做好标记，分别滴一滴抗 A 和抗 B 试剂； 2. 在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血； 3. 用竹签混匀试剂和红细胞，并使混合物直径＞ 15mm； 4. 轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察； 5. 判读、解释并记录反应结果。 （二）反定型： 1. 在玻片上间隔一定距离标明 Ac 和 Bc 字样。 分别滴加 5%的 A 型红细胞悬液、 B 型红细胞 悬液各一滴； 2. 在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴； 3. 混匀（同正定型） ； 4. 轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察； 5. 判读、解释并记录反应结果。 6. 结合正反定型反应结果、判定血型，见表 1 表 1 ABO 血型正反定型试验结果判定 正定型 反定型 抗体试剂 +红细胞标本 红细胞试剂 +血清标本 血型 抗 A 抗 B A 细胞 B 细胞 + O O + A O + + O B O O + + O + + O O AB 三、附注： （一）表中“ O”表示无凝集， “+”表示凝集，一般都是 3-4 个+的强凝集反应； （二） 2 分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应； （三）若得到弱的或可凝集反应结果，该标本应用试管法重新试验； （四）由于新生儿在出生 4~6 个月内，血浆中的 ABO 抗体活动太弱，并且含有来自母亲的 抗体，故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其 ABO 血型； （五）做正定型时，还可加一抗 A、B 血清（ O 型人血清），以检测 ABO 弱抗原；做反定型 时可以加试一 O 型红细胞，借以证实是否有不规则抗体的存在。