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“百数表” 练习
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56
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70
83
99
1、写出个位是5的数:
2、写出个位是2的两位数:
3、写出十位是4的数:
4、数一数个位是8的数有( )个。十位是7的数有( )个。再认真的数一数,个位是5的两位数有( )个。
5、最小的一位数是( ),最大的一位数是( )。
最小的两位数是( ),最大的两位数是( )。
最小的三位数是( )。
6、最小的三位数与最大的两位数相差( ),最大的两位数与最小的两位数相差( )
最小的一位数与最大的一位数的和是( )。
7、20以内有( )个单数,( )个双数。30以内有( )个单数,( )个双数。
40以内有( )个单数,( )个双数。
8、从1写到100,一共写出了( )个8。
9、从1写到100,一共写出了( )个0。
10、 和71相邻的数是( )和( )。
11、 从2、3、7、8、9这五个数字中任选两个,组成的最大的两位数是( ),最小
的两位数是( )。
12、301的百位上的数字是( ), 个位上的数字是( )。 DOJINDO操作说明
细胞活性检测
1.?在96?孔板中接种细胞悬液?(100 ml /孔?)?。将培养板放在培养箱预培养?(在37?℃,5% CO2的条件下?)。
2.?向每孔加入10 ml?的CCK- 8溶液?(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响?O.D值的读数)?。
3.?将培养板在培养箱内孵育?1-4小时。
4.?用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
5.?如果暂时不测定O.D值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入?10 ml 0.1 M HCl溶液或者1% w/vSDS?溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在?24小时内吸光度不会发生变化。
细胞增殖?-毒性检测
1.?在96?孔板中配制?100 ml的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养?24小时?(?在37℃,?5% CO2的条件下?)。
2.?向培养板加入10 ml不同浓度的待测物质。
3.?将培养板在培养箱孵育一段适当的时间?(例如: 6,12, 24?或48小时?)。
4.?向每孔加入10 ml CCK-8?溶液?(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响?O.D值的读数)?。
5.?将培养板在培养箱内孵育?1-4小时。
6.?用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
7.?如果暂时不测定O.D值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入?10 ml 0.1 M HCl溶液或者1% w/vSDS?溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在?24小时内吸光度不会发生变化。
注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加?CCK-8之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。当然药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
制作标准曲线
1.?先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2.?按比例?(?例如:1/2比例?)?依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做?3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3.?接种后培养2-4?小时使细胞贴壁,然后加?CCK-8试剂培养一定时间后测定?O.D值,制作出一条以细胞数量为横坐标?(X轴)?,O.D值为纵坐标?(Y轴)?的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量?(使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入?CCK-8后的培养时间)。
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