3亚硝酸盐的测定.docVIP

海水中亚硝酸盐的测定（重氮－偶氮法） 一、实验目的 掌握重氮－偶氮法测定亚硝酸盐的基本原理，熟悉样品的采集和保存，测定的操作过程和注意事项，如试剂的配制，分光光度计或营养盐自动分析仪的使用等。 二、方法原理 在酸性介质中亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，其产物再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色偶氮染料，于543 nm波长测定吸光值。本法适用于海水及河口水中亚硝酸盐氮的测定。 三、试剂及其配制 1. 磺胺溶液（10 g/L）：称取5 g碘胺（NH2SO2C6H4NH2 2. 盐酸萘乙二胺溶液（1 g/L）：称取0.5 g盐酸萘乙二胺（C10H7NHCH2CH2 NH2 · 2HCl），溶于500 mL水中，盛于棕色试剂瓶中于冰箱内保存，有效期为1个月。 3. 亚硝酸盐标准贮备溶液（10000 μmol/L-N）：称取0.6901 g亚硝酸钠（NaNO2）经110℃下烘干，溶于少量水中后全量转移入1000 mL量瓶中，加水至标线，混匀。加1 mL三氯甲烷（CHCl3 4. 亚硝酸盐标准使用溶液（50 μmol/L-N）：移取0.5 mL亚硝酸盐标准贮备溶液于100 mL量瓶中，加水至标线，混匀。临用前配制。 四、主要仪器及设备 分光光度计；100ml容量瓶；50 mL带刻度具塞比色管；500 mL和1000 mL棕色试剂瓶；其他一般实验室常备仪器和设备。 五、分析步骤 1. 绘制标准曲线 （1） 在6个50ml容量瓶中，分别移入铵标准使用溶液0ml, 0.25ml, 0.5ml, 1.0ml, 2.0ml, 4.0ml， 用超纯水稀释至标线，混匀。此标准溶液系列亚硝酸-氮浓度依次为0μmol/L, 0.25μmol/L, 0.5μmol/L, 1.0μmol/L, 2.0μmol/L, 4.0μmol/L。 （2）将上述标准溶液系列分别转移入六个10ml具塞玻璃瓶中，再分别加入0.2 mL磺胺溶液，混匀，放置5 min；最后再分别加入0.2 mL盐酸萘乙二胺溶液混匀。放置15 min. （3）以水作参比，以扣除空白吸光值Ab后的吸光值An（543 nm，5 cm测定池）为纵坐标，相应的亚硝酸盐-氮浓度Cn为横坐标，绘制标准曲线。用线性回归方法求得标准曲线的截距a和斜率b。将测定数据记录于标准曲线数据表（参见表1）中。 表1 亚硝酸盐标准曲线测定记录表 标准曲线绘制日期： 年 月 日 序号 1 2 3 4 5 6 添加标准使用溶液体积（ml） 标准溶液系列浓度 Cn(μmol/L) 空白吸光值Ab 标准溶液吸光值An An-Ab 备注： 标准使用溶液浓度： 标准曲线回归方程： 仪器型号： 测定波长： nm 截距a= 比色皿： cm 斜率b= 相关系数： 附标准曲线图 绘制者： 校对者： 2. 水样的测定 移取10.0 mL已过滤的水样于具塞比色管中，按照标准曲线绘制操作步骤测量水样的吸光值Aw；同时，量取10.0 mL二次去离子水，于具塞比色管中，按照标准曲线绘制操作步骤测量分析空白吸光值Ab。 3. 计算 C(NO2-N)= 式中，c(NO2-N)，水样中亚硝酸盐氮的浓度，mg/L；Aw，水样中亚硝酸盐氮的吸光值；a，b分别为标准曲线中的截距和斜率。 表2 亚硝酸盐测定记录表 样品瓶号 样品吸光值Aw C(NO2-N) μmol/L 备注 标准曲线斜率 b= 标准曲线截距 a= 空白吸光值 Ab= 六、注意事项 除非另作说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为无亚硝酸盐的二次蒸馏水或等效纯水； 水样可用有机玻璃或塑料采水器采集，经0.45 μm滤膜过滤后贮于聚乙烯瓶中，应从速分析，不能延迟3 h以上，否则应快速冷冻至-20℃ 大量的硫化氢干扰测定，可在加入磺胺后用氮气驱除硫化氢； 水样加盐酸萘乙二胺溶液后，应在2 h内测量完毕，并避免阳光照射； 温度对测定的影响不显著，但以10-25℃ 标准曲线每隔一周应重制一次，当测定样品的实验条件与制定工作曲线的条件相差较大时，如更换光源或光电管、温度变化较大时，应及时重制标准曲线。