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克氏双糖铁琼脂 (KIA) 的原理和使用方法
一． KIA 常用于观察微生物发酵葡萄糖和乳糖的能力，只用 KIA 一种就可以把肠杆菌科细菌和其他科细菌区别出
来。 KIA 成分中含有葡萄糖和乳糖，二者比例为 1： 10， 指示剂为酚红，其在 PH6.8 时变为黄色，而 KIA
PH 为 7.4，产少量的酸就可导致颜色变化。
的
二．生化原理：斜面部分暴露于空气中，为有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境。因此配 KIA 时，最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长度，两者均为 3cm ，以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境。用针穿刺时，取单个菌落，穿刺至底部 3-5mm 处，然后在斜面上往复划线。放 35 度培养 18-24 小时。
三．观察结果：有三种类型
非发酵型：无碳氢化合物发酵，所以无酸产生，斜面上琼脂的肽降解产物是碱性物质导致斜面变红。这种类型的细菌称为非发酵型。
B.非乳糖发酵型 : 如果接种的是发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌，培养基内仅有 0.1% 葡萄糖可以产酸。开始阶段，
培养 8-12h 时，产生的酸足以引起斜面和底部颜色变成黄色。在接下来的时间里，葡萄糖被完全消耗，斜面部分
的细菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸，产生的胺类很快就中和斜面上存在的酸；到 18-24h ，整个斜面又转换
成碱性 PH ，颜色有变成红色。深部（厌氧区域），氨基酸降解不足以中和形成的酸，培养基仍为黄色。
乳糖发酵型
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