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生物活性肽—酪蛋白磷酸肽
生物活性肽
所 谓生物活性肽(Bioactive Peptides,B A P)就是对生物机体的生命 活动有益或是具有生理作用的肽类,是一类分子量小于6000D ,具有多种生物学功能的多肽。
其分 子结构复杂 程度不一,可从简单的二肽到环形大分子多肽,而 且 这些多肽可通过磷 酸化、糖基化或酰基化而被 修 饰 。
生物活性肽的吸收的特点
不需消化,直接吸收。它表面有一层保护膜,不会受到人体的促酶 、胃蛋白酶、胰酶、淀粉酶、消化酶及酸碱物质二次水解,它以完整的形式直进入小肠,被小肠所吸收,进入人体循环系统,发挥其功能。
吸收特别快。吸收进入循环系统的时间,如同静脉针剂注射一样,快速 发挥作用。
它具有l00%吸收的特点。吸收时,没有任 何废物及排泄物,能被人体全部利用。
主动吸收。
吸收时,不需耗费人体能量,不会增加胃肠功能负担。
起载体作用。它可将人所食的各种营养物质运载输送到人体各细胞、组织、器官。
酪蛋白磷酸肽
酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,即CPPs)是以牛乳酪蛋白为原料,经水解、分离纯化而得到的一类富含磷酸丝氨酸的生物活性肽,它可作为无机离子载体促进肠膜对钙、铁、锌、硒、尤其是钙的吸收和利用。
由于CPPs具有很强的促钙吸收活性,正成为功能性食品添加剂的开发和研究热点。
结构特点
CPPs是由a-酪蛋白和G-酪蛋白经酶水解、分离纯化而得 到的一类富含有磷酸丝氨酸和谷氨酸的短肽 。
含有相同的结构,其基本核心结构可表示为:
一SerP — SerP — SerP — Glu — Glu-Glu
具有这种核心结构的磷酸肽分子中带有高度负电荷,能抵抗胃肠消化酶的攻击而免遭进一步分解,从而在体内仍能发挥其生理功能。
CPPs的功能
促进矿物质吸收
以钙为例,许多研究证实,CPPs促进钙质吸收的方式有两 种 :
一种是在十二指肠的上端,在VD 的存在下,可促使钙以主动方式吸收。
另外一种是在回肠及其末端,以被动方式吸收,它与前者不同,不直接受到机体功能、营养状况、年龄等影响。CPPs促进钙的吸收以后一种方式为主。
访谈结果与析
CPPs促进 矿物质吸收的机理是:
CPPs带有较多负电荷,既可以抵抗消化道中各种酶的水解 ,又可以通过磷酸丝氨酰与钙、铁等离子螫合形成可溶物,从而有效地防止溶解的金 属离子在小肠中性或偏碱环境中与磷酸根结合而形成磷酸盐沉淀,同时可有效地增加矿物质在体内的滞留时间,CPPs与金属离子的螯合物被肠 黏膜吸收后再释放出CPPs。
CPPs的功能
促进牙齿、骨骼中钙的沉积和钙化
具体原理为:CPPs磷酸丝氨酸簇结合钙后,以非结晶形式定位在牙蚀部位 。
磷酸丝氨酸钙盐提供自由的Ca2+和PO4-缓冲液,减少了釉质的脱矿,增强其再矿化,从而有效防止牙蚀细菌的侵蚀和造成脱矿物质的过程 。
CPPs的功能
促进动物体外受精和增强机体免疫力
其原因是CPPs促进精子对钙离子的吸收,增强精子顶体的反应能力 ,提高精子对卵细胞的穿透能力。 CPPs还具有增强动物机体免疫力的功能,有研究发现 酪蛋白C端的磷酸基团对抗体的识别具有极高的 临界点。
CPPs的理化性质
溶 解 性
起 泡 性
乳 化 力
热 稳定 性
CPPs产品具有良好的溶解性在 pH2.0~10.0内,均高于90%,且溶解性随pH的增高而增大 。
CPPs产品较酪蛋白具有更好的起泡性和泡沫稳定性。
CPPs产品乳化力较好。但与酪 蛋白相比下降了约20%
在100℃,30 min条件下杀菌不会对产品外观造成改变
CPPs的制备
目前工业制备CPPs的方法主要有钙--乙醇沉淀法、膜分离法和离子交换法3种。其生产过程可大致分为酪蛋白的水解和CPPs的分离两步。
钙--乙醇沉淀法生产CPPs的工艺路线:酪蛋白→胰蛋白酶水解→ 酪蛋 白水解液→钙--乙醇沉淀→分离→干燥→CPPs产品。
膜分离法生产CPPs的工艺路线 :酪蛋白→酪蛋白水解液→过滤→分离→ 喷雾干燥→CPPs产品。
将酪蛋白配成一定浓度的溶液后,用2mol/L的NaOH调至pH8.3左右,加人一定量的胰蛋白酶进行水解,水解过程始终保持溶液pH在7.7~8.5之间,终止水解时加人1mol/LHcl使溶液pH达4.6.然后离心除去沉淀,在上清液中加人10mL
CaC12溶液至终浓度为100mmol/L,再加入等体积的乙醇,离心收集沉淀,最后将沉淀用丙酮、乙醚洗涤后挥发干燥,即得CPPs的复杂混合物
乙醇钙沉淀法
经过阴离子交换树脂处理,除去非磷酸肽,得到含有一定CP
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