组织DNA提提取原理与步骤 详细.pptVIP

组织DNA提取 Tissue dna extraction [实验目的] 令学习从生物组织中提取DNA,为研究DNA的理化 性质与结构功能打好基础 上海交通大学医学院 提取DNA总的原则: 表导 1保证核酸一级结构的完整性; 2其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的 污染应降低到最低程度; 3核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶 剂和过高浓度的金属离子; 4其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除 上海交通大学医学院 原理: 粉碎组织DNP 裂解液 裂解细胞膜、核膜 DNP 苯酚、氯仿 DNA (RNA) RNA酶 Protase K 苯阶,乙醇 纯DNA紫外定量 i11H4F71 上海交通大学医学院 各种组织细胞破碎方法 细胞破碎方法 应用 I机械法 1匀浆法 机体软组织 2捣碎法 动物韧性组织 研磨法 细菌、酵母 Ⅱ物理法 1超声法 细胞混悬液 反复冻融法 培养细胞 3冷热交替法 细菌、病毒 4低渗裂解 红细胞 Ⅲ化学法 1有机溶剂 细菌、酵母 2去垢剂 组织、培养细胞 细菌、酵母 加篇如 上海交通大学医学院 破裂细胞、释放核酸 Extracting DNA from and organism 上海交通大学医学院 Aqueous layer (NA + RNA proteins Phenol Cell extract Mix with Separate laye