生物制品技术 单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳 （课件）免疫电泳.pptx

实验 免疫电泳 实验原理 免疫电泳是将双向免疫扩散实验与琼脂板区带电泳相结合的一种免疫学分析方法。 抗原样品在琼脂凝胶上进行电泳，不同抗原成分因电泳迁移率不同而被分离为若干区带。 停止电泳，在琼脂凝胶横槽中加入抗体血清，抗体与不同抗原成分同时双向扩散，相遇，并在比例适宜处形成沉淀弧线。 根据沉淀线的位置、数量和形状，分析抗原样品中的成分。 实验原理 实验原理 实验方法 制板 将洁净玻片置于水平台面上，用移液管吸取4-4.5ml熔化的1.5％盐水琼脂加于载玻片上，待冷凝。 实验方法 打孔及开槽 挑去孔内的琼脂，槽内琼脂暂不挑出。（打两个孔） 实验方法 实验方法 加样 用微量进样器吸取10μl稀释的牛IgG，兔抗牛IgG（待检测血清）于上、下两小孔中。 电泳 以0.05mol/L pH8.6巴比妥缓冲液为电泳缓冲液，将加样后的琼脂板置于电泳槽上，样品孔靠近阴极端，用缓冲液浸湿的双层滤纸搭桥电泳。一般稳定端电压100V，电泳1h，即可终止电泳。 实验方法 实验报告 双扩散 取出电泳后的琼脂板，挑出中间槽内的琼脂，取50μl兔抗牛IgG血清抗体充满槽内，注意勿外溢。将琼脂板放于湿盒内，水平置于37℃培养箱中进行双扩散，24h后观察结果。 实验方法 实验结果 观察沉淀弧的位置和条数，并画出沉淀弧。 实验报告 根据观察结果绘制沉淀弧的位置和条数。 谢谢观看