mtt法 及细胞凋亡检测.pptxVIP

实验八MTT法检测细胞相对存活率（教材95页）细胞凋亡诱导分析检测技术（教材162页）MTT法检测细胞相对存活率（教材95页）【方法与步骤】（1）传代5×104个/100ml 人子宫颈癌细胞HeLa于96孔板， 37°C培养过夜；（2）每孔加入不同剂量的大蒜素（1、5、10 ml），每种剂量加三孔，以药物溶剂作对照， 37°C培养0.5h；（3）于各孔加入10ml 5mg/ml MTT， 37°C培养1h；（4）吸弃培养液，各孔加入100ml DMSO，振荡培养板， 37°C培养10min；（5）用酶联仪测定光密度值（以空白调零），通过与对照组比较得到实验组的存活率。【结果与观察】 （1）加MTT后，倒置相差显微镜下观察可见黄色的MTT被还原成紫蓝色颗粒，加DMSO后紫蓝色颗粒溶解； （2）各组OD值取平均值后，以下式计算存活细胞百分数： 存活细胞%=（OD实验/OD对照）×100% 对照组实验组大蒜素剂量 1ul 第1组2 3 45ul10ul1ul 5 6 7 85ul10ul10ul10ul1ul910 对照组5ul细胞凋亡诱导分析检测技术Cell Death细胞坏死初期，胞质内线粒体和内质网肿胀、崩解，结构脂滴游离、空泡化