噬菌体展示关键技术解析.docxVIP

噬菌体展示技术解析 噬菌体展示技术经过近20年发展和完善，已被广泛应用于抗原抗体库建立、药品设计、疫苗研究、病原检测、基因诊疗、抗原表位研究及细胞信号转导研究等。噬菌体展示系统模拟了自然免疫系统，使我们有可能模拟体内抗体生成过程，构建高亲和力抗体库。因为噬菌体展示技术实现了基因型和表型有效转换，使研究者在基因分子克隆基础上实现了蛋白质构象体外控制，从而为获取含有良好生物学活性表示产物提供了强有力手段。另外，噬菌体展示技术已成为不经过免疫获取特异性人源抗体新路径，为获取对人类和动物疾病有诊疗和诊疗价值单克隆抗体提供了关键手段。 应用面这么高大上，那么原理到底是什么呢？那接下来将由小编为您揭开其神秘面纱！ 一、噬菌体展示技术原理 噬菌体展示技术（phagedisplay）是将多肽或蛋白质编码基因插入噬菌体外壳蛋白结构基因合适位置，在阅读框正确且不影响其它外壳蛋白正常功效情况下，使外源多肽或蛋白和外壳蛋白融合表示，融合蛋白随子代噬菌体重新组装而展示在噬菌体表面。展示到噬菌体表面多肽或蛋白保持相对独立空间结构和生物活性，能够和靶分子结合和识别。噬菌体展示肽库或蛋白库和固相抗原结合，洗去未结合噬菌体，然后用酸碱或竞争分子洗脱下结合噬菌体，中和后噬菌体感染大肠杆菌扩增，经过3-5轮富集，逐步提升能够特异性识别靶分子噬菌体百分比，最终取得识别靶分子多肽或蛋白。下图粗略展示了技术筛选过程： 二、噬